GB3001萤火虫荧光素酶检测试剂盒-中文说明书.pdfVIP

Biosciences Better Research by Innovation LUCIFERASE ASSAY SYSTEM 萤火虫荧光素酶报告基因检测系统 CATALOG NO. （目录号）GB3001 USER MANUAL （VERSION 1.0） PUBLISHED FEB 2013 用户操作手册 1.0 本产品仅用于科学研究，请勿用于药品、临床治疗、食品及化妆品等用途。 产品特点与工作原理： 萤光素酶（Luciferase ）是自然界中能够产生生物萤光的酶的统称，其中最 具代表性的是Photinus pyralis 萤火虫体内的萤光素酶。Luciferase 报告基因系统 是以荧光素 （luciferin ）为底物来检测萤火虫荧光素酶活性的一种报告系统。荧 光素酶可以催化luciferin 氧化成oxyluciferin，在luciferin 氧化的过程中，会发出 生物荧光 （bioluminescence ）。然后可以通过化学发光仪 （luminometer ）测定 luciferin 氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系，以 其极其灵敏、高效、高通量等特点，成为研究基因表达等细胞生物学过程的重要 手段。 图1、荧光素酶生物发光反应原理 北方健特生物科技有限公司研发的萤火虫荧光素酶报告基因检测系统，具有 高灵敏度、高稳定性、操作简便、兼容高通量操作等特点。与国际著名品牌产品 比较，具有相同的检测效率，在数值较低范围具有更高的灵敏度。 图2、荧光素酶活性检测比较 - 2 - 储存条件与稳定性： 用户收到本产品后，需将试剂盒所包含的所有成分冻存于 -20 ℃，有效期为 180 天。 产品规格 ： 试剂名称 100次 1000次 Luciferase Assay Substrate (冻干粉末) 1 vial 1 vial×10 Luciferase Assay Buffer 10 mL 10 mL×10 5 ×Passive Lysis Buffer 3 mL 30mL 注意事项： 1、 Luciferase Assay Substrate 试剂溶解后，请置于避光处，尽快使用。 若有剩余可分装后保存于 -70℃，避免反复冻融。 2 、 检测开始前，请确保配制好的试剂达到室温。 3、 以下操作程序，适用于贴壁细胞（96 孔板培养模式），若使用其他细 胞请做相应调整。 操作程序（使用试剂盒前请务必仔细阅读） 一、 裂解细胞： 1、根据待检测细胞数量的多少，配制1×细胞裂解液。取4 倍体积的ddH O 加 2 入1 倍体积的5 ×Passive Lysis Buffer 中，混合均匀即可。 2、弃去细胞培养基，用PBS 洗涤细胞2 次（注意勿使细胞脱落），拍干培养板， 勿留残液。 3、加入足够的 1 ×细胞裂解液，完全覆盖细胞。例如：50μL/96 well plate 、 400μL/60 mm dish，或900μL/100 mm dish。 4、反复倾斜摇动细胞培养板，以使细胞裂解液均匀覆盖细胞表面。放置细胞培 养板于脱色摇床或万向摇床上，匀速震荡5-20 分钟。 5、转移50μL 细胞裂解上清至96 孔白色发光板或测量杯中。如不能立刻检测， 可将裂