糖柱使用注意.docVIP

1.色谱柱:Sugar-Pak?TM?1???6.5*300mm?column.??厂家:waters????Part?No:WAT0851882.主要用于分离:葡萄糖(glucose)\麦芽糖(maltose)\果糖(frutcose).3.流动相:超纯水4.流速:0.4-0.6ml/min.5.温度:80-85度.6.一般保存在冰箱冷藏室,防止冷冻. Sugar-pak1使用注意事项?(网上找的)将Sugar-pak1连接在HPLC系统上.?设置流速在0.2-0.3ml/min直到柱温达到70.?在柱温达到70时,流速增至0.6ml/min,流速变化应该以0.1ml/min为增量,待反压稳定后再继续增加流速.?最大流速不应超过0.6ml/min.Waters?Sugar-pak1柱是用来分析糖产品,甜菜,甘蔗,淀粉这些作物在水解过程中的产物,以及用来做糖产品的质量检查,能够将葡萄糖,果糖,麦芽糖,?麦芽多糖从典型的玉米糖浆中的高聚物中分离出来.也可用于酒精的发酵过程中跟踪监控发酵糖的减少和酒精的产生.流动相要求:此色谱柱由钙基树脂填装而成,氢离子或其它离子会取代钙离子,或是引起与柱中糖的置换,尤其是像蔗糖这样易于置换的糖.因此推荐在流动相中加入一定量的钙离子来保持平衡和防止与样品的置换推荐的流动相为去离子的无菌水,含EDTA钙盐约0.0001M(50mg/L).水应去离子化,大于2兆欧的电阻率,水中应不含多价离子,尤其是过渡金属元素和重金属离子.?使用前需用真空泵通过0.45um或更小孔径的滤膜除去细菌和其它颗粒.溶剂过滤推荐使用溶剂过滤器(可从Waters公司获得:110V,部件号:WAT085113,.?220V,?部件号:WAT085102,)合适的滤膜为Millipore的HAWP04700(Waters?部件号:WAT085117).虽然流动相已经在真空过滤时脱气,但还是应该通过以下程序来完全脱气.如果系统连续使用不止一天,请将流动相置于锥形瓶中,放在搅拌器/电炉上,用铝箔封上瓶口以减小蒸发,用前将流动相烧至沸点几分钟,使用时保持温度70-90.这个操作能够保证气体(尤其是CO2)不再重新溶解在流动相中,同时也会防止微生物的滋生.EDTA?钙盐通常有以下几个通用的名字?Calcium?di-sodium(ethylene?dinitrilo)tetra-acetic?acidCalcium?di-sodium?ethylene?diamine?tetraacetateCalcium?di-sodium?edentate要保持装流动相的容器干净,有盖,且新鲜,流动相需每24小时重新配制.平衡:为了保证新柱能在分析使用之前得到足够的钙离子的平衡,我们推荐使用以下程序.将柱子按照通常使用的反方向安装(标签上的箭头指向柱子的入口端).也可用反冲阀.?用至少100ml的0.001M的EDTA钙盐溶液在90用0.5ml/min流速反冲柱子.500mg/L的EDTA钙盐的浓度大约为0.001M.?将柱子反过来(回到通常的流动方向)用分析所用的流动相冲柱子,(用与上一个步骤同样的条件)直到基线平稳方可使用.?注意事项:通常推荐压力不超过2000psi最大流速不超过0.6ml/min(70).?不要在流动相中使用氯化钙,硝酸钙以及其它的强酸的钙盐,这样会腐蚀柱子,破坏填料..?流动相中有机相的最大含量为5%(V/V),样品中少量的乙腈,乙醇,甲醇和异丙醇不会影响柱子的性能..?柱子的温度不要超过95.通常高温会带来高的分辨率,但在90-95之间几乎没有变化,70以下对于许多糖,就异构体的分离来说不能提供足够的分辨率,对于乙醇的定量,柱温应在75..?柱温的快速变化不会对柱子带来什么反作用,如果柱子在60以下,那么最高的流速为0.2ml/min,由于水在低温时的高的粘度因此高的流速会带来很高的反压..?定期反向冲洗色谱柱(在每5L流动相之后),这将会有效地延长色谱柱的寿命..?流速的变化不能超过0.5ml/min,流速变化应该缓慢进行,建议改变流速时以0.1ml/min为增量,直到反压稳定后再继续增加流速.任何的流速变化均要在不超过0.5ml/min下进行.在溶剂输出系统中压力限制的设定应比普通的工作压力高出几百psi,从而避免任何仪器未被注意的额外压力升高..?如果分析的是不易于置换的糖,那么就没有必要在流动相中使用EDTA?Ca,纯水需过滤和脱气,如果要保持柱子适宜的性能,柱子的再生和流路的方向变化要经常进行.保存条件:(72小时以上不用).?关掉柱温箱,停泵..?当柱子冷却,从系统中移出,换上起初随柱子的堵头,柱子在保存过程中