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金免疫技术 我们公司目前拥有 六大技术平台：酶联免疫（ EIA ）、免疫荧光（ IFA ）、金标免疫（ GIA ）、生物芯片（ BIOCHIP ）、快速检测卡（生化反应）类及化学发光免疫类； 我主要是学习金标知识。金标是公司较为新的产品的，它的全名叫做金标斑点免疫法斑点免疫渗滤试验的基本原理是：以双抗体夹心法为例。在硝酸纤维素膜的膜片中央滴加纯化的抗体，为膜所吸附。当滴加在膜上的标本液体渗滤过膜时，标本中含抗原被膜上抗体捕获，其余无关蛋白等没滤出膜片。其后加入的胶体金标记也在渗滤中与已结合在膜上的抗原相结合。因胶体金本身呈红色，阳性反应即在膜中央显示红色斑点。 一、概念：以胶体金作为标记物的免疫检测技术。（灵敏度略低于其他标记技术） 二、有关胶体金的基本知识 1.胶体金概念及来源： 胶体金也称金溶胶，是由金盐还原成金后形成的金颗粒悬液。 2.胶体金颗粒结构： 由一个基础金核(原子金)及包围在外的离子层构成，离子层为负离子(AuCl2-)，外层为H+则分散在溶液中。呈球形(小颗粒)或椭圆形(大颗粒)。 3. 胶体金的特性： A 胶体性质，特别是对电解质敏感，对试验有影响。 B 呈色性：胶体金的光散射性与溶胶颗粒的大小密切相关，一旦颗粒大小发生变化，光散射也随之发生变异，产生肉眼可见的显著的颜色变化。小：2~5nm橙黄色，中：10~20nm酒红色，大：30~80nm紫红色。 C 光吸收性：胶体金有单一吸收峰，光波在510~550nm之间，随颗粒变大而偏向长波长。利用这特性，可进行吸光度检测。 4. 胶体金的制备： 滴加还原剂 ⑴方法： HAuCl4 胶体金颗粒 搅拌 0.01% HAuCl4 100ml 加热至沸，搅拌不断 定量还原剂 (常用0.7ml1%柠檬酸三钠水溶液) 2~3min内变色金黄紫红 继续煮沸15min 冷却至室温 加蒸馏水恢复至原体积。 （所得胶体金λmax为535nm，A535nm=1.12。) 接下来我说说我平时的实验方法吧。 1）将反应板从冷藏环境中取出。必须置37°C温箱中平衡30分钟。后方可使用。 2）加2滴洗涤液于反应板孔中。待液体完全渗入。 3）加入100微升（约两滴）品（也就是血清）待完全渗入。 4）加入4滴洗涤液，待完全渗入。。 5）假入3滴胶体金结合物（加入前反转摇匀）。待完全渗入。 6）于小孔内滴加洗涤液4滴，待完全渗入。 判读结果：在膜中央有清晰的淡红色斑点显示者判为阳性反应；反之，则为阴性反应。斑点呈色的深浅相应地提示阳性强度。