表达IBDV+VP2融合蛋白的重组MDV的构建及其免疫特性研究.pdfVIP

第六属理事会第二次会议暨教学专业委员会2006年会议论文集 力上的作用，可能只限于细胞的嗜性方面，VP2可能不是决定毒力的唯一因素，很可能是致 病性多基因调控的结果【14】。阡2高变区的某些氨基酸的改变可能不足以引起抗原型的变化， 但仍可以导致抗体对病毒的捕捉能力下降，或者使超强毒株作用于抗体其它的受体位点【15】， 从而在足够高的母源抗体存在的情况下仍能感染鸡，并引起发病死亡。 参考文献略 表达IBDVVP2融合蛋白的重组MDV的构建及其免疫特性水 刘红梅1～，秦爱建1‘，刘岳龙1，金文杰1，叶建强1，陈鸿军1，邵红霞1，李迎晓4 (1．扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室，扬州225009 2．安徽农业大学动物科技学院，合肥230036) 摘要将增强型绿色荧光蛋白基因(eGFP)与鸡传染性法氏囊病病毒(1BDV)的VP2基因融合，插入 JS超 强毒进行攻毒，鸡的免疫保护率分别为50％、60％、80％。值得注意的是，5000PFU的rMDV一次免疫1 日龄SPF鸡，其法氏囊组织病理损伤等级与IBD中等毒力活疫苗常规二次免疫相当(2．o，1．5)，其保护效果 无显著差异(P0．05)，而与非重组病毒免疫组相比较，保护效果差异显著(P0．01)，这表明构建的表达 IBDV VP2融合蛋白的rMDV可以有效地为SPF鸡群提供免疫保护作用． 关键词CVl988／Rispens，传染性法氏囊病病毒， 重组病毒， vP2 传染性法氏囊病(Infectionbursaldisease，IBD)是由鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV) 引起的鸡和火鸡的一种高度接触性传染病。IBDV主要影响法氏囊(bursaofFabrieius，BF) B淋巴细胞的分化，导致不同程度的免疫抑制，从而增加对并发和继发性病毒和细菌感染的 易感性。近年来，由于IBDV超强毒株和变异株的流行，导致传统的弱毒苗和灭活苗免疫失 败。因此，开发广谱、高效、安全的IBDV基因工程疫苗成为一项十分紧迫的任务。 在IBDV的5种病毒蛋白中，VP2作为所有中和性抗原表位、部分非中和性抗原表位和 毒力相关抗原表位所在的蛋白一直是IBD疫苗研究的热点。目前，IBDV主要宿主保护性抗 原VP2蛋白已在大肠杆菌、酵母、真核细胞、病毒等多种表达系统中得到表达[1．6】，其中 病毒表达系统由于兼有亚单位疫苗和活疫苗的特点而备受人们的青睐。 马立克氏病毒(Marek’sdisease virus，MDV)是禽的一种疱疹病毒。用其作为载体构建 活病毒载体疫苗是近年来禽病毒基因工程研究中比较活跃的领域。国外许多试验室基于 IBDV VP2基因，筛选出多个表达VP2基因的重组病毒，免疫鸡均有部分重组病毒对IBDV 攻击获得了100％的免疫保护。但随着野外MDV毒力变异增强，．就MD单价疫苗对野外强 利用CVl988作载体表达IBDV 启动子在MDVCVl988株的US2区构建了表达IBDVVP2基因的重组疫苗，但接种的鸡在 攻1BDV超强毒后保护率仅达55％。为了进一步提高IBDV攻毒后的保护水平，本试验选用 区域tu】)为插入位点，通过构建表达IBDVVP2融合蛋白的pUCl8．USl0．VP2转移载体， 与MDV活病毒同源重组，获得了表达VP2融合蛋白的重组病毒，动物免疫和攻毒保护试 验表明，免疫重组病毒对lBDV超强毒的攻击具有良好的保护作用。 +Thisworkwas fromtheNational Researchand support簋l蚵Grant HighTechnology Program Development (86孓2∞2从24SOSl)andFoundationfortheAuthorofNationalExcellentDoctoralDissertationofChina(200256) cn 圆家863高技术项目(2002AA245051)和高等学校全国优秀博士学位论文作者专项基金项目(200256)资助．