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GBS核酸检测 GBS概述 GBS概述 B族链球菌(Group B Streptococcus,GBS) 学名无乳链球菌，革兰氏阳性链球菌，正常寄 居于阴道和直肠，属于条件致病菌。 在20世纪70年代，GBS已被证实为围产期母婴感染的主要致病菌之一，在围产医学中占有不可忽视的地位。 什么是围产期…… 国外研究表明 ，不同地区、不同种族的妊娠晚期妇女GBS带菌率约为6.5％～36.0％，国内报道的妊娠妇女GBS带菌率为3.5%～32.4％，新生儿体表带菌率与母体带菌率相似。在一些特殊人群，如肥胖、糖耐量异常、多次妊娠以及性生活活跃的妇女中带菌率较高。 人群GBS带菌率 是指怀孕28 周到产后一周这一分娩前后的重要时期 围产期保健是指产前、产时和产后的一段时间内，对母亲、胎儿和新生儿进行一系列的保健工作，使母亲健康和胎儿、新生儿的成长发育得到很好的保护。 GBS的传播与感染 感染GBS产妇 未传染给新生儿 30~60% 传染给新生儿 40%~70% 无症状 97% 早发性疾病：败血症，肺炎或脑膜炎 1%~3% 5%会导致死亡 国内外GBS筛查现状 美国疾病控制中心(CDC) 制定了《围产期GBS预防指南》 该指南已经获得以下认可： 美国妇产科学院 美国儿科学会 美国护士助产士协会 美国家庭医生协会 美国微生物学会 美国流行病学会 美国药理学会 在我国，2011年，中华医学会妇产科学分会产科学组在《孕前和孕期保健指南(第1版)》中已将B族链球菌筛查作为一个备查项目。 《围产期GBS预防指南》指出 对所有孕妇于妊娠35～37 周进行GBS筛查，结果阳性者进行预防性治疗 以下情况应进行预防性治疗 ： 本次妊娠有GBS 菌尿 上次新生儿GBS 感染史 在妊娠37 周之前分娩 破膜时间超过18小时 分娩体温超过38.0度 GBS的筛查与预防 阳性(+) 或产时高危因素：早产，产时发热≥38 ℃，胎膜早破≥18小时 不需要抗生素预防 孕35-37周取阴道和直肠拭子作GBS检测 阳性(+) 抗生素预防 未检测 阴性(－) 临产后GBS检测 阴性( － ) 且无产时高危因素 抗生素预防 预防GBS疾病的抗生素使用方案举例: 《围产期GBS预防指南》指出： GBS阳性患者应用抗生素进行预防性治疗 Boyer在1989年研究中指出，产时氨苄青霉素使用超过1小时就可以使得新生儿感染从28%减少到4%。LIN在2001年的研究中表明，与无产时应用抗生素相比，抗生素预防超过2小时的有效率是89%，不足2小时的有效率为71%。 挑战：我妈妈会进行IAP治疗吗？ 有无青霉素过敏 否 是 青霉素G，首次剂量500万单位（静脉注射）然后每4小时250?300万单位，直至分娩或者氨苄青霉素，首次剂量2g（静脉注射），然后每4个小时1g，直到分娩 病人在接受青霉素或头孢菌素时有无出现下列任一症状？ 过敏症、血管性水肿、呼吸窘迫、荨麻疹 否 是 头孢唑啉，首次剂量2G，然后每8个小时1g，直到分娩 红霉素和克林霉素治疗是否有效 否 是 万古霉素每12小时1g（静脉注射）直至分娩 克林霉素每8小时900mg（静脉注射）直至分娩 《围产期GBS预防指南》 GBS检测方法比较 方法学 具体方法 优势 劣势 细菌培养 选择肉汤培养液18-24h，血平皿培养18-36h； 后续药敏学实验：STAEP签定板条培养4-24h后，药敏学分析。 结果判读直观，易开展，成本低，可进行药敏学分析。 周期长（18-60h)，，特别不适合临产时孕妇不知道自身是否有GBS感染的情况；灵敏度较低；实验操作人员需要较深的经验。 细菌抗原检 测 乳胶微粒凝集试验、协同凝集试验、对流免疫电泳试验及酶联免疫试验等。 操作比培养法简便，成本低。 由于B族链球菌血清型较多，容易造成漏检，灵敏度相对较低。 荧光PCR方法检测 荧光探针，PCR法扩增核酸。 采用的是所有B族链球菌cfb基因保守序列，所有GBS都存在；灵敏度最高，出结果快（2h），操作简单。 需要专门的PCR实验室及荧光PCR仪。 PCR介绍 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)，简称PCR，是一种分子生物学技术，用于放大扩增特定的DNA片段；可看作生物体外的特殊DNA复制。 什么是PCR…… PCR原理 PCR一般由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成： ①DNA变性：（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA 。 ②退火 ：（25℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。 ③延伸：（70℃-75℃）：在Taq酶的作用下，以dNTP为原料，从引物的3′端→5′端延