气相色谱-串联质谱法测定动物组织中五氯酚.docVIP

精品论文 参考文献 气相色谱-串联质谱法测定动物组织中五氯酚 （河南省开封市疾病预防控制中心检验科 475000 ） 摘要:应用气相色谱-串联质谱法（gas chromatography-mass sepetrometry , GC-MS）对动物组织中五氯酚（PCP）进行分析测定。将其粉碎拌匀，用酸化丙酮浸提萃取。采用气相色谱-串联质谱对提取到的经纯化后五氯酚进行测定。该方法线性范围为0.20～31.00 ng/mL，线性相关系数为 0.9997，定量下限为 0.10 mu;g/kg，加标回收率为88.73% ～109.97%， 相对标准偏差为6.08% ～9.42%。 关键词: 气相色谱；串联质谱法；动物组织；五氯酚 五氯酚(PCP)曾在世界范围内大量使用，广泛用作防腐剂、抗菌剂、除草剂、杀虫剂等， 而我国是世界上最大的 PCP 生产和消费国[1]。PCP 性能稳定，在生物体内富集率高。PCP 能抑制生物代谢过程中氧化磷酸化作用，导致动物内脏和神经系统的损伤，甚至能在人体中产生生物蓄积作用而致癌[2-3]。正因为 PCP 的诱突变性和广谱毒性，各国纷纷立法对其进行严格限制，并将其列入环境优先监测污染物黑名单。PCP 最终通过各种途径进入到食草动物的身体中，造成了世界范围内的食物污染问题。PCP虽然可在自然光条件下分解或被生物降解，但大部分 PCP 还是会存在于各种沉积物中。动物组织对PCP 具有明显的富集作用，吸附在动物组织中的 PCP 降解十分缓慢。在PCP污染严重地区的动物体中，PCP积累迅速，这些动物体内的 PCP 含量的高低直接影响在其组织PCP 的浓度上[4-6]。为了了解日常食用动物组织中PCP的含量，本研究对日常食用动物（牛、羊、猪、鸡、鸭）肝脏与肾脏组织的PCP水平应用气相色谱-串联质谱联合检测，希望为此类研究提供参考与借鉴。 1 资料与方法 1. 1 仪器与试剂 安捷伦7890A-5975C气质联用仪，PCP 标准品(纯度为 99．0%，德国 Augs-bure 公司)。 正己烷、丙酮、乙酸酐、硫酸、吡啶、四硼酸钠、环已烷、碳酸钾均为分析纯（上海生工生物工程有限公司）。 PCP标准溶液:1 g/L；硫酸溶液:6 mol/L；碳酸钾溶液:0.2 mol/L； 1. 2 标准溶液的配制 称取适量 PCP 标准品，用甲醇溶解， 配制成浓度为1 g/mL 的标准储备液，使用时用甲醇稀释至所需浓度。 1. 3 样品前处理 所有动物组织测试前放入冷冻干燥机中冷冻干燥，然后转移到研钵中研磨粉碎。称取10 g 样品于150 mL 磨口锥形瓶中，加入20 mL硫酸溶液进行酸化，剧烈振荡5 min。加入50 mL 萃取溶剂，常温下超声萃取40 min。将有机相收集于250 mL 磨口锥形瓶中。用 20 mL 溶剂进行第二次超声萃取，合并有机相。在有机相中加入 50 mL 碳酸钾溶液，剧烈振荡15 min。转移到250 mL 分液漏斗中， 静置分层后，将下层水相转移到 150 mL 磨口锥形瓶中， 加入 1 mL 乙酸酐，剧烈振荡 5 min，再加入 10 mL 正己烷，剧烈振荡 10 min， 转移到 125 mL分液漏斗中， 静置分层后弃去下层水相。上层有机相每次用 20 mL 四硼酸钠溶液洗涤， 共洗涤三次。有机相用 0.2 mu;m 滤膜过滤，供测试用。PCP 标准溶液用乙酸酐进行衍生化处理后，再进行气相色谱-串联质谱分析。 1. 4 分析条件 1. 4. 1 色谱条件 安捷伦HP － 5MS 色谱柱(30 m times; 0.25 mm times;0.25 mu;m)；进样口温度:260 ℃；传输线温度:280℃；进样方式:不分流进样；进样量:1.0 mu;L；载气:氦气(纯度 ＞99.999%)， 流速为 1.2 mL/min；溶剂延迟:4 min；程序升温:初温为60 ℃， 保持1 min， 以20℃ /min 升至 240 ℃， 保持 5 min。 1. 4. 2 质谱条件 电离方式:电子轰击离子化(EI)；电离能量:70eV；测定方式:多反应监测(MRM)模式；离子源温度:230 ℃；四极杆温度:150 ℃；氮气流量:1.5 mL/min， 氦气流量:2.25 mL/min；MRM 条件见表 1。 表 1 目标物的多反应监测条件 项 目 保留时间/min 母离子m/z 子离子m/z 驻留时间/ms 碰撞电压/V 五氯酚乙酯 10.341 265.0 201.9 150 15 265.0 170.5* 150 35 注:*定量子离子。 2 结果 2. 1 线性