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高中实验:叶绿体光合色素的提取与分离
叶绿体中色素的提取和分离 (四)点样 用玻璃毛细管吸取少量滤液,沿铅笔划横线均匀画出一条细而直的滤液细线。 (六)观察实验结果 练习册P28 实验4.3 叶绿体中色素的提取和分离 要求: 实验两人一组,每人分别制作一份滤纸条(写上学号),并将各自结果黏贴在实验报告上。 叶绿体色素纸层析顺序(自下而上)标注在结果处。 完成课本P68分析讨论1、2 由于接触了层析液等有毒化学药品,做完实验后一定要用肥皂将手洗干净。 分别在A、B、C三个研钵中加5克剪碎的新鲜菠菜绿叶,并按下表所示添加试剂,经研磨、过滤得到三种不同颜色的溶液,即:深绿色、黄绿色(或褐色)、几乎无色(表中“+”表示加;“—”表示不加)。试回答下列问题: * 实验目的:学会提取和分离叶绿体中色素的方法。 (一)提取色素: 原理:叶绿体色素不溶于水但能溶解在有机溶剂中,所以可用无水酒精提取色素。 叶绿素 类胡萝卜素 叶绿素a(蓝绿色) 叶绿素b(黄绿色) 胡萝卜素(橙黄色) 叶黄素(黄色) 叶绿体中的色素 (一)提取色素的步骤方法: 1.研磨 材料:5g去除主叶脉的绿色菠菜鲜叶 药品 石英砂——★使研磨充分 碳酸钙 ——★防止色素被破坏 无水乙醇(分2-3次加入) ——★溶解色素 一、绿叶中色素的提取和分离 迅速、充分 2.过滤:获取绿色滤液 脱脂棉扯松后 放在漏斗底部 色素随层析液在滤纸上扩散速度不同,从而分离色素。 扩散速度与色素在层析中的溶解度的关系: 溶解度大,扩散速度快 溶解度小,扩散速度慢 (二)分离色素——★纸层析法 原理: (三)准备滤纸条 滤纸顶部写上学号 ★要求:细而直 ★避免色素在扩散时重叠,从而不会影响不同色素带的观察 ★要求:重复2—3次 ★保证滤线上色素的含量 玻璃毛细管 (五)分离色素: 插滤纸条 层析液 小烧杯 ★层析液不能浸没滤液线,防止叶绿体色素溶解在层析液中! 滤液细线 胡萝卜素 叶黄素 叶绿素a 叶绿素b 色素提取液呈淡绿色的原因分析; (1)研磨不充分,色素未能充分提取出来。 (2)称取绿叶过少或加入无水乙醇过多,色素浓度小。 (3)未加碳酸钙或加入过少,色素分子部分被破坏。 — + — 蒸馏水(10毫升) + — + 95%乙醇(10毫升) + + — CaCO3(少量) + + + SiO2(少量) C B A 处理 (1)A处理得到的溶液颜色是 ,原因是 。 (2)B处理得到的溶液颜色是 ,原因是 。 (3)C处理得到的溶液颜色是 ,原因是 。 黄绿色 部分叶绿素受到破坏 几乎无色 叶绿素不溶于水 深绿色 大量叶绿素溶于乙醇中 *
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