手工丽春红S法检测尿总蛋白的分析性能验证及与干化学法的比较.docVIP

精品论文 参考文献 手工丽春红S法检测尿总蛋白的分析性能验证及与干化学法的比较 马美红 陈春妍（惠东县人民医院检验科 广东惠东 516300） 【摘要】目的 建立手工丽春红S法检测尿蛋白的性能验证方案和实验方法。方法　参考美国临床和实验室标准化协会（CLSI）系列文件和相关文献[3-5]，结合工作实际，设计验证方案。对手工丽春红S法检测尿蛋白的精密度、准确度、分析灵敏度、分析测量范围、临床可报告范围等性能进行验证和评价，并将实验结果与美国强生Vitros 350干式生化分析仪所检测尿蛋白的结果进行比较。结果　尿蛋白含量在0.2g/L、4.0g/L时，手工丽春红S法测得日间不精密度分别为6.4%和1.05%；10个标准浓度检测结果与靶值的相对偏差均小于6.4%；检测低限为0.2g/L；生物检测线在0.2～4.0g/L，功能灵敏度为0.5g/L，分析测量范围为0.2～4.0g/L。厂商提供的美国强生Vitros 350干式生化分析仪日间不精密度CVlt;2.4%；检测低限为0.012g/L；分析测量范围0.017～0.024g/L。结论　建立了临床手工丽春红S法检测尿蛋白的分析性能验证方案和实验方法。本研究对规范医学实验室建设和实验室认可，提高实验室手工法检测质量有重要意义。 【关键词】　性能验证　尿总蛋白　丽春红比色法　干化学法 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）23-0035-03 国际标准化组织（ISO）于2003年颁布了《医学实验室质量和能力的专用要求》（ISO 15189）[1] 作为医学实验室认可的标准，该标准要求申请认可的实验室应对设备、检测系统或方法的主要分析性能进行验证，证实其能够达到所要求的性能标准。我国2006年颁布的《医疗机构临床实验室管理办法》要求，对未开展室间质评的检验项目，临床实验室必须对检测系统的分析性能进行评价，才可将分析系统用于常规工作。国内近几年对各种全自动分析检测仪器的性能验证的报道不在少数，但对临床手工法的检测性能验证却很少。如何合理选择、系统设计定量检测项目方法学性能验证方案和实验方法的报道，更是少之又少。故在此我们参考美国临床实验室标准协会(CLSI)系列文件和相关文献，结合具体实际，探讨临床手工丽春红S法测定尿蛋白的方法学性能验证方案和实验方法，并将结果与国际公认的质量指标进行比较。 一、材料与方法 1.仪器和试剂 722S型分光光度计（上海科技仪器公司）及丽春红S染料、蛋白沉淀剂三氯乙酸以及0.2mol/L氢氧化钠溶液，具体方法参考全国临床操作规程（第三版）。 二、验证方法和实验方法 1.精密度验证实验：严格按照分光光度计标准操作规程对仪器进行维护保养、校准和质量控制，选择低值（0.2g/L）和高值（4.0g/L）2个浓度的标准品，按标本检验程序进行吸光度测定。每天1次，连续20次，计算x-plusmn;s和变异系数CV。 2.准确度验证实验：（1）用浓度2.0g/L的校准品校准检测系统测定其吸光度，再对其它浓度的校准品进行检测，换算成浓度后将其检测结果与各自的标示值（靶值）进行比对，并计算检测值与靶值的相对偏倚（%），与可接受限进行比对。 3.分析灵敏度验证实验：分析灵敏度或检测限系指检测系统可检测的最低分析物浓度。包括检测低限（lower limit of detection, LLD）、生物检测限(biologic limit of detection, BLD )、和功能灵敏度（functional sensitivity, FS）。按参考文献[5-6]介绍的方法进行验证。（1）样品制备：对原70g/L的丽春红标准品分别稀释成1/5g/L、1/4g/L、1/3g/L、1/2g/L、1.0g/L、2.0g/L、2.5g/L、3.0g/L、3.5g/L、4.0g/L的浓度，作为分析灵敏度的实验样品；（2）样品测定：空白样品批内重复测定10次，其他系列样品天间重复测定10次，记录每次检测的发光强度值（RLUs）和浓度值（g/m）；（3）LLD的确定：LLD为样品单次检测，可以达到的非空白检测响应量对应的分析物的量。按99.7%的可信限，最低浓度样品RLUsx-plusmn;3s所对应的尿蛋白含量即为LLD；（4）BLD的确定：某样品单次检测可能具有的最小响应量刚大于空白检测低限响应量，该样品内含有的分析物浓度为BLD。以LLD的发光强度值为界，在系列低浓度结果中，某浓度下的RLUsx-plusmn;3s的RLUs，刚好大于LLD的吸光度值，此样品光强度均值对应的尿