预防兽医李氏杆菌教学课件.pptVIP

Thank You ! 穿刺接种半固体动力培养基，室温（20～25℃）培养2～5d，逐日观察。有动力。自穿刺线向四周蔓延生长，呈典型伞状生长，底部为弯月牙状。 动力试验 过氧化氢酶： 过氧化氢酶又称接触酶，能催化过氧化氢分解成氢和氧。菌落－平板－1滴3％的过氧化氢。 生化试验 尿素酶（Urease）试验 穿刺接种尿素琼脂斜面，35℃培养5d，逐日观察阴性。 有些细菌能产生尿素酶，将尿素分解、产生2个分子的氨，使培养基变为碱性，酚红呈粉红色； 。 1、未接种 2、尿素酶阳性 3、尿素酶阴性 MMA平板 OXA平板 挑取5个可疑菌落，接种TSA-YE平板，进行纯培养。纯化菌落再转接到TSB-YE肉汤，35℃培养24h。进行生化试验。 分离 蓝色或者兰灰色，扁平圆润，稍有凸起，边缘整齐，菌落较小，约为0.5mm左右。 划线接种于MMA或者OXA平板，35 ℃培养 24～48h。斜射光镜检。 菌落呈黑色，直径1mm，在其周围形成一个黑色环。 PALCAM CHRO Magar 2mm灰绿色中心黑色凹陷，菌落周围呈棕黑色水解圈 蓝色菌落周围呈白色晕圈 舌麻痹而引起的流涎、脱水而引起的眼窝凹陷病牛 眼睑麻痹肿胀而引起的角膜炎病牛 严重的斜颈和倒地不起的病牛 局部麻痹所引起的左侧耳朵下垂的病牛 初患牛突然出现食欲废绝、精神沉郁、低头垂耳、轻热、不随群行动等症状由于舌和咽部麻痹，水和饲料都不能咽下。不久就出现头颈一侧性麻痹和咬肌麻痹可见大量持续性的流涎，最后倒地不起，发出呻吟声，病牛死于昏迷状态。孕牛发生流产；病程短者2～3d，长者1～3周或更长。 猪：表现运动失调，无目的行走或后退，前、后肢张开呈观星姿势肌肉震颤、僵硬，阵发性痉挛，侧卧时四肢做游泳状。仔猪以败血症为主，表现体温升高、咳嗽、呼吸困难、腹泻、有的有神经症状，病发率较高。 病猪感染后表现角弓反张 的神经症状 早产儿感染发病时，主要表现呼吸急促、黏膜发绀、呕吐、尖叫和抽搐等；1～3 周龄的病儿则呈现拒食、高热、和昏迷等症状；人在感染后3-70d出现症状，健康成人可出现轻微类似流感症状，易感者突然发热，剧烈头痛、恶心、呕吐、腹泻、败血症、脑膜炎、孕妇出现流产。 李斯特病者的胎儿 患者的皮肤 单 核 细 胞 增 多 脑膜脑炎型可见脑充血，水肿，脑脊髓液增加，混浊，血管周围有以单核细胞为主的细胞浸润 MMA (李氏菌选择性培养基) 作用：单核细胞增生李斯特氏菌的选择性分离培养 原理：胰胨、多价胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖提供碳源；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸氢二钠为缓冲剂；甘氨酸、氯化锂、苯乙醇和复达欣可抑制非李斯特氏菌以外的部分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌；琼脂是培养基的凝固剂. 配方： 胰 胨 多价胨? 牛肉膏粉? 葡萄糖 氯化钠? 磷酸氢二钠 甘氨酸 氯化锂 琼 脂 最终pH 5g 5g 3g 1g 5g 1g 10g 0.5g 15g 7.3±0.2 PALCAM琼脂 用途：用于单增李氏菌选择性分离（FDA标准） 原理：蛋白胨提供生长必须的碳氮源；酵母膏粉和淀粉提供碳氮源、维生素和生长因子；氯化钠可维持均衡的渗透压；葡萄糖提供碳源；李斯特氏菌水解七叶苷与铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素；甘露醇是可发酵的糖，酚红是pH指示剂；氯化锂和其它的抗生素能抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌；琼脂是培养基的凝固剂。 配方：（g/L） 蛋 白 胨  可溶性淀粉  酵母浸粉  D-甘露醇  七 叶 苷  柠檬酸铁铵 D-葡萄糖 氯 化 锂 琼 脂 氯 化 钠 酚 红 pH 值 23.0 1.0 3.0 10.0 0.8 0.5 0.5 15.0 13.0 5.0 0.08 25℃ CHROMagar? 法国科玛嘉李斯特菌显色培养基 用途：用于分离和鉴定单核增生李斯特菌 成分（g/L） 琼脂 蛋白胨和酵母浸出物 NaCl 色素 pH 15.0 23.0 5.0 17.5 7.0±0.2 OXA—牛津琼脂 用途：用于食品和药品中单增李氏菌的分离培养 原理：蛋白胨提供氮源和氨基酸，可溶性淀粉消除一些毒性物质，氯化钠维持渗透压，琼脂是凝固剂，氯化锂抑制革兰氏阴性菌生长，混合抗菌剂抑制除李氏菌外的革兰氏阳性菌生长，李氏菌分解七叶苷与铁离子结合形成黑色菌落，并在菌落周围形成棕色的环。 配方： 特殊蛋白胨 可溶性淀粉 氯 化 钠 琼 脂 七 叶 苷 柠檬酸铁铵 氯 化 锂 pH 牛津琼脂添加剂 23.0 1.0 5.0 13.0 1.0 0.5 15.0 7.0±0.2℃ 5ml/ 支 TSA-YE (胰酪胨大豆酵母浸膏琼