转基因小麦的定性pcr筛选检测技术-麦类作物学报.pdfVIP

麦类作物学报 　2007 ,27 (3) :378 - 381 J ournal of Triticeae Crop s 转基因小麦的定性 PCR 筛选检测技术 栾凤侠 ,张洪祥 , 白　月 ( 黑龙江出入境检验检疫局 ,黑龙江哈尔滨 15000 1 ) 　　摘 　要 : 为了建立转基因小麦的 PCR 检测方法标准 , 以B73 、B72 、B 102 三个被转入外源高分子量谷蛋白 ( ) 亚基 HMWGS 基因的转基因小麦品系为材料 ,对 目前国内外转基因小麦中通用的标记基因 ba r 和 ui dA 、 N OS 终止子和 Ubiqui ti n 启动子进行了定性 PCR 的筛选检测 ,在国内外首次找到了小麦中特有的内参照基 ( ) ( ) 因麦谷醇溶蛋白基因 GA G56D ,设计并合成了麦谷醇溶蛋白基因 GA G56D 和 Ubiqui ti n 启动子的引物序 列 ,并对 PCR 反应条件进行了优化 ,PCR 产物经过琼脂糖凝胶电泳分析后 , 可以检测到预期大小的目的片 段 。同时对 PCR 产物用实时荧光定量 PCR 进行了确证实验 ,并得到预期的结果 。定性 PCR 最低检测灵敏 ( ) 度为 0 . 5 % w/ w 。建立的转基因小麦定性 PCR 筛选检测方法具有通用性 。 　　关键词 : 小麦 ; 转基因; PCR ;定性检测 ( ) 　　中图分类号 :S5 12 . 1 ; S336 　　　文献标识码 : A 　　　　文章编号 :1009104 1 2007 Screening and Detecting of Genetically Modif ied Components in Transgenic Wheat by PCR L UAN Fengxia , ZHANG Hongxiang , BAI Yue ( Heilongj iang Ent ryExit In sp ection and Quarantine Bureau , Harbi , Heilongj iang 15000 1 ,China) Abstract : A s t he t ran sgenic p ro duct s being managed st rict ly in many count rie s an d t he great p ro gre ss achieved in co mmercial t ran sgenic w heat , it i s import ant to e st abli shed t he det ection met ho ds of t ran s genic w heat . Geno mic DN A f ro m w heat wa s ext ract ed f ro m B73 , B72 an d B 102 , w heat line s t ran s f er red by HM W gene . Polymera se chain reaction s were u sed to det ect t he ubiquitin p ro motor , N OS