MCM7、p27在结肠腺癌中的表达及其临床意义的研究.docVIP

精品论文 参考文献 MCM7、p27在结肠腺癌中的表达及其临床意义的研究 张明明1 蒋颖恒2 罗运生1 夏涛1 李威1 甘涛1 杨颢1 崔健华1 王韦吉1 （1柳州市人民医院胃肠外科 545001） （2柳州市人民医院中医内科 545001） 【摘要】目的：检测结肠腺癌组织细胞中MCM7、p27蛋白的表达，探讨MCM7,p27二者表达异常与人结肠腺癌发生、发展的关系。方法：采用免疫组织化学SP法检测40例结直肠腺癌，30例结肠息肉等非癌病变组织中MCM7、p27蛋白的表达。结果：40例结直肠腺癌中MCM7蛋白的阳性表达率为100%，与正常对照组的表达差异有显著意义(Plt;0.001)。结直肠腺癌组中MCM7蛋白的阳性表达与组织学分级有关，高分化组均显著低于中、低分化组(Plt;0.05，Plt;0.05)。淋巴结转移组中MCM7蛋白的阳性表达显著高于无淋巴结转移组（(Plt;0.05）；癌组中P27 蛋白的阳性表达为72.5% (29/ 40），P27 蛋白表达水平高低与组织学分级有关，高、中分化组均显著高于低分化组（Plt;0.05)。癌组中MCM7蛋白的表达与P27呈负相关（r = - 0.4920, Plt;0.01）。而MCM7和p27的表达均与结直肠腺癌的性别、年龄、肿瘤大小、组织学无关（Plt;0.05），p27的表达尚与淋巴结转移无关（P=0.9319）。结论：细胞复制准许因子MCM7蛋白的高表达和细胞周期检测点负调控因子P27蛋白的低表达可能涉及了人结直肠腺癌的发生和发展过程，MCM7蛋白的高表达与癌细胞的增殖、侵袭和转移有关，MCM7和p27蛋白的联合检测可作为评价结直肠腺癌细胞的增殖状态、预测结直肠腺癌临床预后、指导临床治疗的重要生物学指标。 【关键词】结直肠腺癌 MCM7 P27 免疫组织 【中图分类号】R730.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）25-0162-02 细胞增殖失控是恶性肿瘤的发生和侵袭、转移的最基本特征，而细胞周期中任何一个调控环节的失控都可导致细胞增殖的异常。微小染色体维持蛋白[minichromosome maintenance (MCM) proteins]基因其编码的MCM蛋白家族是一组与准许启动DNA复制密切相关的蛋白质。其蛋白家族共同构成DNA复制许可因子，启动DNA复制，DNA复制一旦完成，即从染色体脱离，从而确保在每个细胞周期染色体仅复制一次，保证细胞复制的正常性和精确性[1]。P27作为细胞增殖的负调控因子，其表达失常可导致细胞异常增殖。我们采用SP法免疫组化技术检测人正常肺组织和结肠腺癌组织中MCM7、P27蛋白的表达，比较其相关性及其与结肠腺癌临床病理特征的关系，以探讨二者表达失常与人结肠腺癌发生、发展的关系。 材料与方法 1.病例来源：40例病例随机选自柳州市人民医院胃肠外科2000年1月～2012年12月手术切除的结直肠腺癌病例材料，结直肠腺癌的病理诊断、分级和TNM分类按2007年NCCN，结直肠腺癌组织学分类标准进行。其中：腺泡样腺癌12例，粘液腺癌6例，类癌2例，乳头状腺癌20例，女性病例12例。年龄范围：36～79岁。选取30例乳头状管状腺瘤、炎性息肉旁正常组织材料作为对照组。按NCCN2007结肠癌TNM分期标准分为Ⅰ期14病例;Ⅱ期10例,Ⅲ期13例,Ⅳ3例。其中伴有淋巴结转移者24例，无淋巴结转移者16例.40例腺癌患者术前均未行放、化疗。标本经10%中性福尔马林固定，石蜡包埋，常规切片。 2.方法：（1）免疫组织化学检测：采用SP法，MCM7（47DC141）和p27（DCS-72.F6）单克隆抗体分别购自NeoMarkers公司和福州迈新生物技术公司，SP试剂盒（Kit-9710）购自福州迈新生物公司。MCM7和p27切片均需作微波抗原修复处理，免疫组化染色操作步骤按文献进行[2]。（2）结果判断： MCM7和p27蛋白检测以细胞核出现棕黄色颗粒为阳性标志， MCM7、p27染色的判断参照Bukhlm等[3]提出的标准。计数ge;500个肿瘤细胞，以细胞核内出现棕黄色颗粒且阳性细胞数＜10%为（－），10～30%为（＋），30～70%为（＋＋），＞70%为（＋＋＋）。用已知人乳腺癌MCM7和p27阳性切片作阳性对照，以PBS取代一抗作阴性对照。 3. 统计学处理 应用SPSS10.0统计学软件对所得数据行x2检验、秩和检验和Spearman等级相关分析，以P＜0.05为显著性检验