微生物的培养和利用微生物的培养和利用.ppt

选修1 微生物的培养和利用——原理?技术?应用 北京理工大学附属中学 苏明学 北京考试说明 微生物的培养和分离 某种微生物数量的测定 培养基对微生物的选择作用 利用微生物进行发酵来生产特定的产物 发酵过程中亚硝酸盐含量的测定 微生物知识和技术思维导图 1.哪些生物属于微生物？（举例说明） 有细胞结构 真菌类：酵母菌、霉菌 衣藻、硅藻 草履虫、变形虫 细菌、蓝藻 放线菌、衣原体 支原体 原核生物 无细胞结构：病毒 原生生物 2.培养这些微生物需要哪些营养条件？ 主要种类 作用 碳源 CO2、NaHCO3、糖类、脂肪酸等 构成结构物质、能源物质 氮源 N2、NH3、铵盐、硝酸盐、尿素、蛋白胨 合成蛋白质、核酸等 生物因子 维生素、氨基酸、嘌呤碱和嘧啶碱 补充生长因子 其他 水和无机盐 生命必需物质 3.培养基的种类和作用？ 按性质分 固体培养基：用于分离、鉴定 半固体培养基：用于观察、保持菌种 液体培养基：用于扩大培养或生产 按营养分 天然培养基（成分不明确）：用于生产 合成培养基（成分明确）：分离、鉴定 按用途分 选择培养基：用于分离菌种 鉴别培养基：用于鉴别不同种微生物 鉴别尿素分解菌 加入刚果红，菌落周围产生透明圈 鉴别纤维素分解菌 未接种的尿素培养基 10-5 10-4 加入酚红指示剂 伊红美蓝培养基 乳糖 有机酸 大肠杆菌 和伊红美蓝发生反应，出现紫色带有金属光泽的菌落 如利用伊红美兰培养基鉴定并分离大肠杆菌 氨苄青霉素 X-gal IPTG（卵磷脂） 1.微生物培养的基本程序 培养基的配制—称量→溶化→调pH→分装→包扎 灭菌（高压蒸汽灭菌） 接种 固体培养基—平板划线（接种环）、稀释涂布（涂布器） 液体培养基—用接种环蘸取菌液（扩大培养） 培养 固体培养基—倒置，37℃恒温培养箱，24h左右 液体培养基—空气浴或水浴培养箱（摇床），震荡培养 固体培养基—划线的末端出现单菌落 液体培养基—培养液变浑浊 观察 废弃菌种和培养基灭菌后丢弃 1.平板划线法 为什么能获得单菌落？操作时应注意的问题？未获得单菌落可能的原因有哪些？ 平板划线法 2. 稀释涂布平板法 为什么要对菌液进行梯度稀释？ 稀释的浓度为多少才算合适？ 每一个稀释度的菌液接种1个平板可以吗？为什么？ 稀释涂布法还可以用来计数，其记录的活菌数比实际数目多还是少？为什么？ 计算公式： 每克样品菌数=同稀释度菌落平均数÷0.1×10 纯化技术 ——将一个优良菌株的单个菌落分离出来，常用斜面接种法 现有如下几种混合微生物，请设计方案，将其一一分离（只写出简单的实验思路即可） 酵母菌、硝化细菌、乳酸杆菌、耐高盐的金黄色葡萄球菌、尿素分解菌、纤维素分解菌 菌种 选择培养基 鉴别培养基 酵母菌、霉菌 培养基中加入青霉素 金黄葡萄球菌 培养基加入高浓度食盐溶液 圆褐固氮菌 配制的培养基不含氮素 分解尿素的细菌 以尿素为氮源固体培养基 培养基加入酚红 大肠杆菌 伊红-美兰培养基 纤维素分解菌 培养液含有纤维素 培养基加入刚果红液 * * * * 北京理工大学附属中学 苏明学 北京理工大学附属中学 苏明学 * * * *