毛细管柱色谱法测定食品防腐剂山梨酸和苯甲酸的探讨.docxVIP

毛细管柱色谱法测定食品防腐剂山梨酸和苯甲酸的探讨福建工贸学校郑定钊[摘要]该文采用AT.食品添加剂分析专用毛细管柱(30m×0.53mm×1.00μm)，对山梨酸和苯甲酸两种常见防腐剂进行测定，实验表明，通过对色谱条件的优化，在柱温190℃，载气流速160kPa条件下，在3.5min内实现基线分离，各组分分离良好,分析速度快,准确度高，山梨酸回收率为88.04﹪～94.71﹪，RSD≤4.3﹪；苯甲酸回收率为94.02﹪～104.47﹪，RSD≤1.4﹪。[关键词]气相色谱毛细管柱山梨酸苯甲酸应用洗涤两次，静止15min，用滴管将乙醚层通过10g无水硫酸钠滤入25mL容量瓶中。加乙醚至刻度，混匀。准确吸取5mL乙醚提取液于5mL带塞刻度试管中，置40℃水浴上挥干，准确加入2mL石油醚-乙醚(3+1)混合溶剂溶解残渣，待测液。1.3.2标准溶液的制备准确称取山梨酸、苯甲酸各0.2000g(按其纯度折算为100%的质量)，置于100mL容量瓶中，用石油醚-乙醚(3+1)混合溶剂溶解后并稀释至刻度。此溶液每毫升相当于2.0mg山梨酸或苯甲酸。再用石油醚-乙醚(3+1)配成每毫升相当于50、100、150、200、250ug山梨酸或苯甲酸混合标准使用液。1.3.3标准曲线的绘制进样2uL上述标准使用液于气相色谱仪中，测得不同浓度山梨酸、苯甲酸的峰面积，以浓度为横坐标，相应的峰面积值为纵坐标，绘制标准曲线，如图1所示。得到山梨酸、苯甲酸的线性回归方程如下：山梨酸：Y=633.069X-1229.91，r=0.9995；苯甲酸：Y=676.0884X-5188.0，r=0.9998。苯甲酸和山梨酸是常用于食品中的防腐剂，具有抑制或杀灭微生物，保持食品鲜度，延长食品保质期的作用。长期过量食用这些防腐剂，对人体会有一定的毒性，抑制骨骼生长，危害人体的肾脏和肝脏。因此，我国《GB2760食品添加剂使用卫生标准》对苯甲酸和山梨酸的使用范围和最大使用量作了严格的限制。毛细管柱气相色谱法具有操作简便、分离效果好、灵敏度高、检出限低、精密度高、结果准确的特点,现就毛细管柱气相色谱法测定食品中苯甲酸和山梨酸色谱条件进行讨论，实验表明通过对色谱条件的优化，不仅分离效果好，同时提高了分析的灵敏度高、节省了不少分析时间，结果满意。1实验部分1.1仪器与试剂日本岛津GC—14C气相色谱仪，附FID检测器，食品添加剂分析专用毛细管柱(30m×0.53mm×1.00μm)；山梨酸(天津市福晨化学试剂厂)纯度≥98%,苯甲酸(上海久亿化学试剂有限公司)纯度≥99%，乙醚、石油醚、盐酸、氯化钠、无水硫酸钠均为分析纯。1.2色谱条件温度：进样口230℃；检测器230℃；柱温190℃。气流速度：载气为氮气，160kPa（70mL/min)；氢气为50mL/min；空气为500mL/min；吹尾气为30mL/min；分流比为1:30。1.3分析步骤1.3.1样品预处理称取2.5g±0.01g混合均匀的试样，置于25mL带塞量筒中，加0.5mL6mol/L盐酸酸化，用15mL、10mL乙醚提取两次，每次振摇1min，将上层乙醚提取液吸入另一个25mL带塞量筒中，合并乙醚提取液。用3mL酸性氯化钠溶液(pH=4)面积(x100,000)1.501.251.000.750.500.250.00050100150200浓度山梨酸1142012年第6期（总第66期）海峡科学EX—试样中山梨酸或苯甲酸的含量(mg/kg)；m1—测定用试样液中山梨酸或苯甲酸的质量(ug)；V1—加入石油醚-乙醚混合溶剂的体积(mL)；V2—测定时进样的体积(uL)；m—试样的质量(g)；面积(x100,000)1.501.251.000.750.502结果与讨论0.250.002.1色谱条件的优化与色谱图在确保分离效果的前提下,通过改变载气流速和柱温对色谱条件进行优化。在柱温170℃条件下，载气流速从60kPa开始，按20kPa递增，得到各流速下色谱图，如图2所示。050100150200浓度苯甲酸图1山梨酸、苯甲酸工作曲线1.3.4结果计算m1?1000X?m?5?V2?100025V1μV(x10,000)1.21.11.00.90.80.70.60.50.40.30.20.10.0-0.10.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.012.013.014.015.016.017.0min60kPa谱图（a）μV(x10,000)1.21.11.00.90.80.70.60.50.40.30.20.10.0-0.10.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.012.013.014.0min120kPa谱图（b）μV(x10,000)1.2色谱