改良番红O-固绿软骨染色液操作步骤及染色结果说明.pdfVIP

改良番红O-固绿软骨染色液操作步骤及染色结果说明 货号：G1371 规格：5×50ml/5×100ml 有效期：6个月有效 产品简介： 软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。软骨根 据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。软骨染色方法有很多种， 例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。 改良番红0-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色， 嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而成绿色或蓝色，与呈现红色的软骨对比鲜明，从而将软骨 组织和骨组织区分开。番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨组织是基于阳 离子染料与多糖中阴离子基团（硫酸软骨素或硫酸角质素）结合。番红O着色与阴离子的浓 度近似成正比关系，间接反映了基质中蛋白多糖的含量和分布。当软骨受到损伤时，软骨中 的糖蛋白会释放出来，使基质成分分布不均匀，从而导致番红O淡染或不着色。通过图像分 析软件可对番红O染色的软骨基质进行定量分析。固绿与胶原纤维结合，不宜褪色。番红 O-固绿染色的分化很关键，分化过度易导致切片不着色，分化不足易导致切片着色过深。 产品组成： 名称 规格 5×50ml 5×100ml Storage A1:Weigert A液 25ml 50ml RT 避光 试剂(A) A2:Weigert B液 25ml 50ml RT 避光 临用时，取A1、A2等量混合为Weigert染液，24h后失去染色力，不宜预先配制。 试剂(B): 酸性乙醇分化液 50ml 100ml RT 试剂(C): 固绿染色液 50ml 100ml RT避光 试剂(D): Safranin O stain 50ml 100ml RT 避光 试剂(E): 乙酸溶液 50ml 100ml RT 使用说明书 1份 自备材料： 10%福尔马林固定液，脱钙液，蒸馏水，系列乙醇。 操作步骤 （仅供参考）： 1、 标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。 2、 常规脱蜡至水。 3、 入新鲜配制的Weigert染液染色3-5min。 4、 酸性乙醇分化液分化15s。 5、 蒸馏水洗 1min。 6、 在固绿染色液内浸染5min，蒸馏水洗 1min。 7、 入Safranin O stain 内浸染1-2min，蒸馏水洗1min。 8、 用乙酸溶液洗涤切片1-2min，以便去除残留的固绿，蒸馏水洗1min。 9、 分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。 10、二甲苯透明，光学树脂封固。 染色结果： 软骨基质 深红色 软骨细胞核 蓝色 细胞浆、肌肉、胶原纤维及骨组织 灰绿色 软骨细胞浆 红色 细胞核 灰黑色 注意事项： 1、 需要显示细胞核时，尽量采用铁苏木素染色，其着色力强色调浓，