免疫亲和柱技术在粮油卫生安全检测中的应用研究.pdf

第39卷第2期 Vol.39，No.2 2014年4月 Apr.2014 第39卷2014年第2期 Grain Science and Technology and Economy 免疫亲和柱技术在粮油卫生安全检测中的应用研究 魏文忠，魏 芹 （ 安阳市粮油饲料产品质量监督检验所，河南 安阳 455000） 摘要］免疫亲和柱技术是一种有效的残留检测净化技术, 可 简化样品提取过程并高效提高样品的纯度 ，具 ［ 有高亲和性 、高专一性和可逆结合等特性 ，在粮油卫生安全检测 中得到了广泛应用。对免疫亲和层析 的原 理、特性 、关键技术作 了详细的阐述, 并对其在粮油卫生安全检测 中的应用与进展进行 了介绍。 ［关键词］免疫亲和柱 ；浓缩；纯化 ；粮油卫生安全；检测 免疫亲和柱（Immuno affinity column ，IAC）是利 时也可能因复杂的操作过程而污染了药品，降低了 用免疫亲和层析原理制成用以分析检测抗体或抗 药物的品质，另外在纯化和浓缩的过程中，有机溶剂 原的亲和层析柱，是一种简化样品提取过程并提高 的毒性及对环境的污染性都不可避免。 样品纯度的样品前处理技术，可有效的分离和纯化 而免疫亲和柱则将要被纯化的目标物的抗体偶 各自互补的免疫物质。在粮油卫生安全检测中，免疫 联在固态物质表面上（如纤维、玻璃珠或硅胶等），利 亲和柱更多的用于对真菌毒素的检测分析，现在市 用抗原抗体反应的高亲和力、高专一性和可逆结合 场已有多种真菌毒素的商品化亲和柱，使用效果非 的特性，进行分析检测。IAC 通过这种特性，从复杂 常好，而这些IAC 常被用作检测分析样品前处理的 的混合物环境中分离提取出目标物及其类似物（交 纯化管柱。 叉反应物）。 也可利用抗体对目标物和其类似物的亲和力不 1 免疫亲和柱技术的原理及其特性 同，通过改变移动相的条件而将它们层析分离开，采 免疫亲和柱技术原理是柱子中含有连接单克隆 用分级梯度洗脱的方式来进行。其步骤是根据移动 抗体的凝胶悬浮物，这种抗体对某种物质有特异吸 相的条件，先利用洗脱力较弱的移动相，将样品中 附性。当含有这种特异吸附性的待测物流过免疫亲 的目标物和类似物吸附在固定相上，其他物质被洗 和柱时，被柱子中的抗体所吸附，结合提取，然后再 脱出管柱；随后改变洗脱条件，将目标物及其类似物 采用淋洗、静化等适当措施，去掉非目标分析物后， 逐一冲出亲和柱，达到萃取、纯化、分离及检测目标 使被测物被选择性提取与浓缩，所得提取物可直接 物的目的。利用IAC 的这些特点，可以简化样品处 采用GC、HPLC、ELISA 等方法进行检测。 理和检测的时间，可以避免有机溶剂的大量使用，对 与普通的免疫色谱技术相比，免疫亲和柱技术 ［ ］ 1 操作人员的健康及环境不会造成极大危害 。 具有高亲和性、高专一性和可逆结合等特性。一般的 免疫色谱技术在检测一些具有交叉反应的分析物 2 免疫亲和柱技术在粮油安全检测中的应用 时，存在无法分辨的缺点，分析物往往需要做进一步 随着合成真菌毒素特异性抗体技术的不断提 确认鉴定，再用其他的方法如气相-质谱法做再确 高， 可以获得越来越多的真菌毒素特异性抗体，利用 认。如果交叉反应物与分析的目标物又互为光学异 这些抗体制成的免疫亲和柱正成为一种新的前处理 构物