抑制TIGAR表达可以增加非小细胞肺癌细胞对化疗药物的敏感性-tumor.PDFVIP

肿瘤2014 年4 月第34 卷第4 期　TUM OR Vol. 34, April 2014　　 303 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2014.04.002 Copyright© 2014 by TUM OR Basic Research 基础研究 · 抑制TIGAR表达可以增加非小细胞肺癌细胞对化疗药物的敏感性 1 1 1 1 1, 2 1 张　腾 ，俞小凤 ，苗　萍 ，赵小平 ，黄　钢 ，刘建军 1. 上海交通大学医学院附属仁济医院核医学科，上海　200127；2. 上海交通大学医学院健康科学研究所，上海　200025 [摘要]　目的：探讨小干扰RNA （small interfering RNA ，siRNA ）抑制TP53 诱导的糖酵解和凋亡调节因子 （TP53-induced glycolysis and apoptosis regulator ，TIGAR ）表达后对肺腺癌A549 细胞化疗敏感性的影响及其可能 的作用机制。方法：化学合成针对TIGAR 基因的特异性siRNA 片段 （siRNA-TIGAR ）和对照干扰片段 （siRNA- control ）。将siRNA-TIGAR 或siRNA-control 转染至A549 细胞后，应用实时荧光定量-PCR 和蛋白质印迹法检 测细胞中TIGAR mRNA 及蛋白的表达，CCK-8 （cell counting kit-8 ）法检测依托泊苷、5- 氟尿嘧啶、顺铂、依 托泊苷联合N- 乙酰-L - 半胱氨酸和H O 作用后细胞的存活率，FCM 法检测H O 作用后细胞的凋亡率及细胞 2 2 2 2 内活性氧 （reactive oxygen species ，ROS ）水平。结果：siRNA-TIGAR 转染组A549 细胞中TIGAR mRNA 及蛋 白的表达水平明显下降 （ P ＜0.01 ）；依托泊苷、5- 氟尿嘧啶和顺铂对siRNA-TIGAR 转染组A549 细胞的半数抑 制浓度 （half inhibitory concentration ，IC ）明显降低 （P ＜0.05 ）；H O 作用后，siRNA-TIGAR 转染组A549 50 2 2 细胞的存活率下降、凋亡率和细胞内ROS 水平上升 （P ＜0.05 ）；依托泊苷联合N- 乙酰-L - 半胱氨酸作用后， siRNA-TIGAR 转染组和siRNA-control 转染组A549 细胞对依托泊苷敏感性之间的差异无统计学意义（P ＞0.05 ）。 结论：抑制TIGAR 的表达可以增强A549 细胞对化疗药物的敏感性，其机制可能与细胞内ROS 水平的改变有关。 [关键词]　癌，非小细胞肺；RNA 干扰；抗药性，肿瘤；活性氧；TIGAR [中图分类号]　R734.2 [文献标志码] A [文章编号]　1000-7431 (2014) 04-0303-07 Inhibition of TIGAR expression can increase the sensitivity to chemotherapy in A549 non-small cell lung cancer cells 1