产双功能褐藻胶裂解酶菌株的筛选与初步研究-现代生物医学进展.pdfVIP

5606 现代生物医学进展 Progress in Modern Biomedicine Vol.13 NO.29 OCT.2013 产双功能褐藻胶裂解酶菌株的筛选与初步研究* 郭恩文1,2,3 王 亚1,2,3 于文功1,2,3 韩 峰1,2,3 (1 266003 2 266003 海洋药物教育部重点实验室 山东青岛 ；山东省糖科学与糖工程重点实验室 山东青岛 ； 3 中国海洋大学医药学院 山东青岛266003) ： -D- ，又能降解聚 -L- ，可以用一种酶来制备不同结构的褐 摘要 目的 双功能褐藻胶裂解酶既能降解聚茁 甘露糖醛酸 琢 古罗糖醛酸 。 藻胶寡糖。本文的目的是筛选能产生双功能褐藻胶裂解酶的菌株，对其产酶曲线和降解产物作初步研究 方法：利用唯一碳源培 养基筛选产生褐藻胶裂解酶的菌株，通过 16S rDNA 序列比对进行菌种鉴定，通过在凝胶上检测褐藻胶裂解酶活性来判断发酵上 。 清液中褐藻胶裂解酶的数量及分子量，利用薄层层析确定降解褐藻胶的终产物组成 结果：从褐藻上筛选到一株海洋细菌 QY 107 ，鉴定为弧菌属细菌。发酵120 h 时褐藻胶裂解酶产量为12.32 U/mL ，其发酵液上清中只含有一种褐藻胶裂解酶，分子量在 28 kDa ，并且对聚 -D- -L- ，降解褐藻胶的终产物主要为三糖。 ： 左右 茁 甘露糖醛酸和聚琢 古罗糖醛酸都能降解 结论 本文筛选到一 株弧菌QY 107，其发酵液上清中只有一种双功能褐藻胶裂解酶，可用于大量制备褐藻胶三糖。推测该酶具有特殊的催化腔结构， 对其结构与功能相互关系的研究可能会发现新的底物结合与催化机制。酶解制备褐藻胶寡糖因其环保 效而越来越受到人们的 重视，因此该菌株能促进海洋寡糖类生物制品的开发，在医药、食品、农业、生物燃料 领域具有广阔的应用前景。 ： ；弧菌 关键词 褐藻胶裂解酶；双功能酶；菌株筛选；菌株鉴定 Q936 Q557 A 1673-6273 2013 29-5606-04 中图分类号： ， 文献标识码： 文章编号： （ ） Screening and Characterization of a Bifunctional Alginate Lyase-Producing Bacterium Strain* Bifunctional alginate lyases, which could degrade both poly 琢-L-guluronic acid and poly β -D-mannuronic acid, could be used to prepare alginate oligosa