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动物微生物和免疫学
动物微生物学与免疫学 教学安排 实验地点:动科大楼403 教 材:兽医微生物学,陆承平主编,第四版 (2007) 参 考 书: 1)郭万柱等主编:动物微生物学,四川科技出版社 2)崔治中,崔保安主编:兽医免疫学,中国农业出版社 第一版(2004) 3)刘玉斌等:动物免疫学实验技术,吉林科学技术出 版社。 绪论 ??? 一、微生物概念 个体微小、结构简单、多细胞或单细胞甚至无细胞结构、繁殖快、分布广。 9大类:细菌、真菌(霉菌和酵母菌)、放线菌、螺旋体、支原体(霉形体)、立克次氏体、衣原体、病毒、朊病毒。 二、微生物学发展历史 (一)形态学时期(17世纪后叶~19世纪中叶): 荷兰吕文虎克( 1676 ):显微镜。 巴斯德的曲颈瓶实验(1861):否定生物自然发生论。 巴斯德的著名曲颈瓶实验 (二)生理学及免疫学时期: (1870~1920) 巴氏消毒法。 厌氧菌发现(厌氧生命活动过程)。 疫苗研制(炭疽杆菌苗、狂犬病疫苗) (三)现代微生物学时期: (1920~至今) 电镜认识微生物的亚细胞结构,发现病毒。 微生物的分离、培养、鉴定方法; 酶标技术、细胞培养技术、单克隆技术; 微生物核酸序列测定、核酸探针技术,PCR技术、基因工程研究, 第一节 细菌的形态 一、细菌的大小 以最适温度、最适培养基培养的幼龄细菌为标准。 以微米(um)为单位。 球菌:直径。 杆菌和螺旋菌:长*宽。 二、细菌的基本形态及变化 (一)球菌 1、双球菌 2、四联球菌 3、八叠球菌 4、链球菌 5、葡萄球菌 (二)杆菌 1、单在杆菌(大肠杆菌) 2、链杆菌(炭疽杆菌) 3、芽胞杆菌(破伤风梭菌) 4、梭菌(魏氏梭菌) 5、球杆菌(布氏杆菌) 6、分枝杆菌(结核分枝杆菌) 7、棒状杆菌(化脓棒状杆菌) 8、弯杆菌(空肠弯曲菌) (三)螺形菌 1、螺菌:几个弯曲 2、弧菌(霍乱弧菌):一个弯曲 三、细菌的群体形态-菌落 细菌均进行无性分裂繁殖,分同形分裂和异形分裂。 1、菌落概念:一个细菌在固体培养基上生长繁殖,形成肉眼可见的细菌群体堆积物。又称“克隆”,根据菌落数量,进行细菌计数,用菌落形成单位(CFU:colony forming unit)表示。 2、菌落特征:菌落大小、 菌落形状、边缘形状、表面形状、隆起度、颜色、透明度、粘稠度、血平板上溶血情况 细菌繁殖 细菌菌落特征 大肠杆菌粉红色菌落 第三节 细菌的基本结构 细胞壁 细胞膜 细菌的基本结构 细胞质 核体 细胞内含物 细菌细胞结构示意图 一、细胞壁 (一)结构 1、革兰氏阳性菌 G+菌的细胞壁无分层结构。 40~95%为肽聚糖(peptidoglycan),磷壁酸(teichoic acid:TA;包括壁磷壁酸wall teichoic acid和脂磷壁酸lipoteichoic acid)、外膜蛋白(outer membrance protein:OMP)等充满于网状结构之中。 肽聚糖由N—乙酰葡萄糖胺,N—乙酰胞壁酸形成网状结构。 TA是特异的表面抗原。 革蓝氏阳性菌细胞壁 2、革兰氏阴性菌 细胞壁具有分层结构 。外膜由外膜蛋白(OMP)(包括微孔蛋白、脂蛋白)、脂多糖(LPS) 构成;周质间隙(外膜与细胞膜之间的间隙)中有1-2层肽聚糖及多种蛋白酶、核酸酶。肽聚糖占细胞壁干重的10~20%。 LPS由类脂A、核心多糖、侧链多糖组成。类脂A是内毒素的主要毒性成份,侧链多糖为菌体O抗原。 革蓝氏阴性菌细胞壁 肽聚糖结构 (二)革兰氏染色原理 1、染色步骤 结晶紫(紫色) 1-2分钟,冲洗 革兰氏碘液 2-3分钟,冲洗 95%酒精 30-60秒,冲洗 稀释石炭酸复红(红色) 10-30秒,冲洗 镜检 G+菌染成紫色 结晶紫与G氏碘液形成复合物充斥于肽聚糖网状结构之中。 95%的酒精具有收缩肽聚糖和溶解脂质作用,收缩肽聚糖使网眼缩小,溶解脂质使网眼扩大。 G + 菌因肽聚糖多(40~60%) 、脂质少,网眼缩小的力量大于网眼扩大的力量,最终使网眼缩小,将紫色复合物牢
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