实时荧光pcr法检测鼠伤寒沙门氏菌 detection of salmonella typhimurium by real-time fluorescent pcr.pdfVIP

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2017-11-19 发布于上海
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实时荧光pcr法检测鼠伤寒沙门氏菌 detection of salmonella typhimurium by real-time fluorescent pcr.pdf

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实时荧光pcr法检测鼠伤寒沙门氏菌 detection of salmonella typhimurium by real-time fluorescent pcr

第3卷第4期 NO．4 食品安全质量检测学报 V01．3 2012年8月 JournalofFood and SafetyQuality Aug．，2012 实时荧光PCR法检测鼠伤寒沙门氏菌荣策1，赵彤彤2，许龙岩3，刘宇2，那晗2，曹际娟24 (1．大连工业大学生物工程学院，大连116034；2．辽宁出入境检验检疫局，大连116001： 3．广东出入境检验检疫局，广州510623) 摘要：目的建立实时荧光PCR法检测鼠伤寒沙门氏菌的方法。方法基于鼠伤寒沙门氏菌1I型限制酶基因，设计引物及Taqman探针，利用实时荧光PCR进行特异性、灵敏性及模拟样品的检测实验。结果特异性探针可从25种血清型沙门氏菌(共49株)及11株阴性对照菌株中检测出全部的11株鼠伤寒沙门氏菌。以鼠伤寒沙门氏菌梯度稀释菌液DNA为模板进行实时荧光PCR实验，菌株模板浓度与ct值呈良好线性关系，线性系数僻2)为o．998，扩增效率90％，最低检测浓度300cfu／mL。对已接种鼠伤寒沙门氏菌的4种模拟样品同时进行实时荧光PCR检测和传统方法鉴定，两者结果一致。结论此方法特异、灵敏、准确，适于食品中鼠伤寒沙门氏菌的检测。关键词：实时荧光PCR法；鼠伤寒沙门氏菌；Taqman探针；沙门氏菌属 DetectionofSalmonella real—timefluorescentPCR typhimuriumby RONG Ji—Juan2+ Cel，ZHAO Long—Yan3，LIUYu2，NAHan2，CAO Tong—Ton92，XU 1 (1．CollegeofBioengineering，DalianPolytechnicUniversity，Dalian16034，China； and 1 2．LiaoningEntry—ExitInspectionQuarantineBureau，Dalian16001，China； and 51 3．GuangdongEntry-ExitInspectionQuarantineBureau，Guangzhou0623，China) forthe Amethodwas detectionofSalmonella real—time ABSTRACT：0bjeetive developed typhimuriumby fluorescentPCR．Methods tothe of IIrestriction of set and genetype enz