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关于新病毒鉴定的研究进展 The progress in the research about the identification of novel virus 【摘要】：随着新型病毒不断被发现，新病毒的鉴定对于治疗、预防和控制病毒感染起着重要的作用。本综述首先从形态学的角度阐述如何鉴定新病毒，包括了病毒的分离和培养，以及电子显微镜观察。但仅仅形态学上的鉴定是不足够的，需要结合分子生物学的手段。目前最常用分子生物学的手段是构建系统进化树，这不仅可以了解病毒的核酸和氨基酸序列，而且可以阐明病毒的起源及其变异。 【关键词】：新病毒，鉴定，形态学，分子生物学 Abstract: Along with continuous discovery of novel virus, how to efficiently identify them plays an essential role in the treatment, prevention and control of virus infection. Firstly, this review will describe how to identify novel virus morphologically, includingthe isolation and culture of virus as well as observation throughtransmission electron microscopy. However, evidence from morphology is not enough for virus identification. Therefore, it is necessary to combine it with molecular biological means. So far, Phylogenetic trees has become the most popular molecular biological way used to virus identification, which can illustrate the sequence of nucleic acid and amino acid as well as the origin and gene variation of virus. Key word: novel virus, identification, morphology, molecular biology 近年来，随着人类活动范围的增大以及交流的增多，陆续出现人类感染新型病毒的情况，由于人类对新型病毒缺乏免疫力，其感染会对人类健康造成很大的威胁，严重者甚至威胁患者生命。因此，快速准确鉴定新型病毒不仅有利于临床上确定有效的治疗方法，更有助于公共卫生机构采取有效措施切断传播途径，降低其对人群的威胁。本综述将从形态学和分子生物学这两个方面展开论述，讨论关于新病毒鉴定的研究进展。 1.形态学 首先我们要明确新型病毒的感染病例，病毒感染常见的症状是发热，中性粒细胞减少，淋巴细胞升高，病情严重者会出现高热，严重的身体不适，恶心，呕吐，腹泻，明显的出血倾向，白细胞减少，严重的血小板减少，凝血功能异常等 ADDIN NE.Ref.{AF40A49D-C38D-4AB4-B3C0-B38D6E412C1A}[1, 2]。但由于感染的症状不具有特异性，需要相应的辅助检查，当辅助检查无法确定病原体时，我们就要警惕是否是新型病毒感染，应马上开展以下措施来明确病原体。 1.1分离病毒 首先收集患者标本，如血清，组织标本，鼻咽拭子，尿液，粪便，痰液等，然后按照相应的方法处理标本，标本采集后应立即冷冻保存并迅速送到实验室。最后向标本加入1000μ/mL青霉素，1000μ/mL链霉素，2000r/min离心30min，取上清作病毒的分离培养 ADDIN NE.Ref.{01E88AF9-B57E-4D2E-8DF0-9F31F0DD24BA}[3]。 1.2病毒培养 1.2.1鸡胚培养法 鸡胚培养法是用来培养某些对鸡胚敏感的动物病毒的培养方法，此方法可用于多种病毒的分离、培养，毒力的滴定，中和试验以及抗原和疫苗的制备等。病毒分离一般使用10天大小的无菌鸡胚 ADDIN NE.Ref.{229078BC-2BA3-495A-A86D-BA62D5C1C4F1}[4]。鸡胚培养的技术比组织培养容易成功，也比接种动物容易，无饲养管理及隔离等特殊要求，而且鸡胚一般无病毒隐性感染，同时它的敏感范围很广，多种病毒均能适应，因此，鸡胚培养法是常用的一种培养动物病毒的方法。 1.2.2乳鼠接种法 选择健康的3-5日龄乳鼠，在