线粒体功能演稿.pptVIP

线粒体功能及其检测 线粒体是真核细胞的一种细胞器，包括四个功能区隔 :外膜、内膜、膜间隙和基质。 主要化学成分是蛋白质和脂类，其中蛋白质占65-70%，脂类占25-30%。 外膜 (out membrane) 膜孔蛋白（porin）、离子通道蛋白以及Bcl-2 家族蛋白。 由膜孔蛋白构成的亲水通道，允许分子量为5KD以下的分子通过，1KD以下的分子可自由通过。 内膜 （inner membrane） 电子传递链(呼吸链)复合物I~IV 和复合物V(ATP 合成酶)。 通透性很低，仅允许不带电荷的小分子物质通过，大分子和离子通过内膜时需要特殊的转运系统。 膜间隙(intermembrane space) 细胞色素C 电压依赖性阴离子通道(VDAC)、ADP/ATP转换蛋白。 线粒体膜转运孔道(mitochondrial permeable transition pore，MPTP)存在于内外膜接触点。 凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor，AIF)和Procaspase 2、3、9 及其他酶蛋白。 基质（matrix） 三羧酸循环：除糖酵解在细胞质中进行外，其他的生物氧化过程都在线粒体中进行。催化三羧酸循环，脂肪酸和丙酮酸氧化的酶类均位于基质中。 线粒体基因组：基质具有一套完整的转录和翻译体系。包括线粒体DNA（mtDNA），70S型核糖体，tRNAs 、rRNA、DNA聚合酶等。 存储钙离子的致密颗粒。 线粒体DNA 线粒体基因组 哺乳动物的线粒体基因DNA没有内含子，几乎每一对核苷酸都参与一个基因的组成。 线粒体基因组能够单独进行复制、转录及合成蛋白质。 仅有少数线粒体蛋白质是由mtDNA编码，大多数线粒体蛋白质（90%）还是由核DNA编码。 mtDNA 环状，编码2 种rRNA、22 种tRNA和13 种参与呼吸链形成的多肽。 通常裸露且不含内含子，既缺乏组蛋白保护和完善的自我修复系统，又靠近内膜呼吸链，极易受环境影响，突变频率比nDNA 高10~20 倍。 如果线粒体DNA发生突变，不能产生足够ATP而导致细胞功能减退甚至死亡，临床上表现复杂多样，即线粒体病。 母系遗传。 线粒体功能 能量供应 氧化应激 凋亡 钙储池 细胞周期、信号转导 肿瘤 发育等 线粒体与能量供应 细胞有氧呼吸和供能的场所，供应细胞生命活动95%的能量。 线粒体的主要功能是把氧化各种底物产生的自由能转化为可被细胞直接利用的形式－ATP。 线粒体具有能量代谢与自由基代谢两条途径。 线粒体与氧化应激 线粒体是细胞中产生活性氧的一个重要部位，消耗氧用于合成ATP的同时不可避免地产生活性氧。 氧化应激作用下，膜转运孔道开放造成线粒体基质内的高渗透压，使线粒体内外H+梯度消失，呼吸链脱偶联，能量产生中断。 还会由于水和溶质的进入使基质肿胀并导致外膜破裂，通透性增高，释放出包括细胞色素C在内的各种活性蛋白。 过多自由基的产生可导致mtDNA的损伤，氧化损伤是mtDNA突变的主要原因。 线粒体本身也极易受氧化应激的攻击。 活性氧在启动和调节细胞凋亡的过程中扮演着重要的角色。 活性氧的积累可以导致： 线粒体膨大，线粒体内膜非特异性孔道产生； 细胞色素C从内膜脱落并进入到胞质中； BAX表达，caspase活化等。 这些都是启动细胞凋亡的因素。 从线粒体释放的细胞色素C与凋亡诱导因子、Procaspase 9结合在一起形成“凋亡体”（Apoptosome），导致Caspase 9和Caspase 3的激活。 内膜Bcl-2 家族蛋白调控紊乱。 Caspases激活、胞浆Ca++水平升高、产生神经酰胺，直接或间接地引发膜转运孔道持续开放。 钙储池 线粒体感受到钙微区，通过膜上协同转运体将钙摄入基质，然后以磷酸钙的形式储存在一些较大的致密颗粒中。 积累的Ca2+ 又可以通过钠－钙交换系统和膜转运孔道再次释放到胞质，从而调节胞浆中钙离子的动态平衡，影响细胞内许多相关的生理活动，如信号传导、能量代谢和细胞凋亡。 Ca2+能结合线粒体膜转运孔道上的金属结合位点，开放膜转运孔道，从而诱导渗透压的改变、ATP的耗竭和线粒体的皱缩，细胞色素 C释放，活化 Caspase 9和Caspase 3，诱发细胞凋亡。 线粒体功能紊乱 线粒体病（primary genetic defects） 线粒体病理性损伤 mtDNA突变(点突变、缺失、插入）导致线粒体功能缺陷。如线粒体肌病和脑肌病、线粒体眼病、老年性痴呆、帕金森病、糖尿病等。 mtDNA突变随着年龄累积。 线粒体功能变化 mtDNA突变 呼吸链复合体I～IV活性下降 ATP