吸光光度法10秋.ppt

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吸光光度法 Spectrophotometry 光度法 吸光光度法有哪几种类型? 对于含铁量仅为0.001%试样中的铁,若采用氧化还原滴定法测定,即使氧化剂标准滴定溶液浓度很稀(1.6×10-3mol·L-1),也仅需0.02mL即达终点,显然无法测定。 如若对样品进行适当处理,在一定条件下,以邻菲啰啉做显色剂与Fe2+反应生成橙红色配合物,根据溶液颜色的深浅与标准溶液比较,即可确定试样中的铁含量。 *利用比较溶液颜色深浅来测定物质含量的方法称为“比色分析”。 另外,对上述橙红色的有色溶液也可使用分光光度计进行吸光度测定,进而确定试样中的铁含量。 *利用分光光度计测定物质含量的方法称为分光光度法。 比色分析和分光光度法统称为吸光光度法。 分光光度法和比色法的区别是什么? 分光光度法和比色法的区别在于所用或所测量光的“单色程度”(即所含波长范围的宽窄程度)不同。 *比色法是指应用单色性较差的光(即包含相当宽的波长范围的光)与被测物质作用所建立的分析方法。 比色法只在可见光区使用。 在这种条件下,光的波长范围可由所呈现的颜色来表征(黄580~600nm,紫400~450nm等);光的相对强度可由颜色深浅来区别,因此称之为比色法。 按检测方式的不同比色法可进一步分为 目视比色 用眼睛作为检测器 光电比色 用光电管作为检测器 目视比色 1.用同质材料的比色管 2.加入不同量的标准溶液 3.加同量的显色剂,定容到相同体积,配成一套标准溶液色阶 4.待测物(左1)与标准色阶的配制条件相同,置于色阶中比较颜色深浅(介于2&3之间)给出结果(大致)。 光电比色借助光电比色计测出标准系列的A1.........An,给出标准曲线,从曲线上根据被测物的AX,求出cX *分光光度法是指应用波长范围很窄的光(即较纯单色光)与被测物质作用所建立的分析方法。 按所用光的波谱区域范围的不同,分光光度法可进一步分为 紫外分光光度法 可见分光光度法 和AAS法比较有哪些相同与区别? 相同之处:都属于吸收光谱分析;基本原理一样 都是基于物质对紫外或可见光的吸收建立的分析方法 区别在于:吸光物质的存在形式不同 AAS法的吸光物质是基态原子 吸光光度法的吸光物质是溶液中的分子、离子(无机物)或官能团(有机物) 因此两种方法所用仪器(组成)不同、分析方法和特点也不完全一样。 吸光光度法有哪些特点? 与化学容量法相比 1.灵敏度高 检测限达10-4~10-5mol·L-1 2.选择性好 多组分样品,可不经分离   3.准确度高 相对误差为2%~5%,适于微量组分测定 近年来随着卟啉类、双偶氮类、荧光酮类系列新显 色剂的开发成功,将应用范围扩展到痕量级组分测定上 4.仪器简单、操作简便、分析速度快 5.属于相对比较测量 ,所以离不开标样 6.应用广泛 几乎所有无机物和多数有机物都适用 还常常用于配合比、配合常数、酸碱平衡常数等的测定 分子吸收光谱是如何产生的? 分子吸收光谱的形状是什么样子的? 原子吸收光谱是怎样产生的? 原子吸收光谱是什么形状的? 分子吸收光谱是如何产生的呢? 是由于分子外层电子选择性吸收了某些波长的光。 分子吸收光谱是什么形状的呢? 分子吸收光谱是带状的。 为什么分子吸收光谱是带状的呢*? 原因:分子外除了有电子运动 还有组成分子的原子之间的振动 分子作为整体的转动。 三种运动各自对应一定的能级,并且它们都是量子化的。 *分子光谱为什么呈现的是简单并且较宽的吸收带? 由于溶液中的分子(或处于液态的物质)之间距离较小,相互之间的作用力大,使分子转动受限——转动峰消失; 在多数场合下,待测组分分子与溶剂分子之间的相互作用,又使分子的振动受限——振动峰消失; 因此,溶液中的吸光物质——分子或离子的电子光谱(紫外可见光谱)呈现的是一些简单并且较宽的吸收带。 同样因为电子光谱是一些较宽的吸收带,所以所用仪器可采用连续光源、色散率不高的单色器(如使用滤光片分光也可用光栅或棱镜)、使用较宽的出射狭缝、较不灵敏的检测器(甚至在可见光区可以用眼睛观察) 比色法不需要单色光光源,其余各类分光光度法都需要一定纯度的单色光做光源(但获取方法不同;AAS用HCL,紫外可见由单色器提供x-0.x

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