动物细胞培养和核移植技术(一)教学.pptVIP

§2.2.1 动物细胞培养和核移植技术  第1课时 人造皮肤 一、动物细胞培养 动物细胞培养的过程 动物细胞培养的过程 动物细胞培养的条件 动物细胞培养技术的应用 ①动物细胞培养的过程 * 动物细胞培养：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 动物细胞培养的过程是怎样的？ 培养时又需要提供哪些必要的条件呢？ ①进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ 用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适宜环境pH为7.2～8.4。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，而胰蛋白酶在此环境中活性较高，因此胰蛋白酶适宜用于细胞培养时的消化。 ②胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？ 胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。 ③培养贴附性细胞时需注意什么？ 细胞要能够贴附于底物上才能生长增殖，这就要求培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒，易于贴附。 ④什么是原代培养？ ⑤什么是传代培养？ 动物组织消化后的初次培养。 原代培养一段时间后，贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。这样的培养过程通常称为传代培养。传代培养的细胞一般传至10代后就不易传下去了。 用胰蛋白酶处理 分散成单个细胞 剪碎组织 制成细胞悬液 转入培养液中 进行原代培养 贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶处理 分散成单个细胞，制成细胞悬液 转入培养 液中进行 传代培养 放入二氧 化碳培养 箱中培养 取动物组织块 多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的内环境的知识，思考并讨论以下问题： 2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件？ 充足的营养供给、适宜的温度、适宜的pH和气体环境。 无菌、无毒的环境。 1.体外培养细胞时需要提供哪些物质？ 1.无菌、无毒的环境 2.营养 ①对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还会在培养液中加抗生素。②定期更换培养液 糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。使用合成培养时，通常需加入血清、血浆等一些天然成分。 为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？ 必需氨基酸 、胰岛素、生长激素 、多种生长因子 3.温度和pH 36.5±0.5℃ 7.2~7.4 4.气体环境 O2 CO2 （95%空气加5% O2的混合气体） 1.生产生物制品 新型艾滋病病毒疫苗 干扰素 单克隆抗体 2.基因工程 基因工程技术中常用的受体细胞。 3.检测有毒物质 4.培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面研究，如用于筛选抗癌药物。