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生物选修3现代生物科技专题 专题1 基因工程 专题1 基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具 一、限制性核酸内切酶 ——“分子手术刀” 二、DNA连接酶——“分子缝合针” DNA连接酶——“分子缝合针” 三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” 1.使用载体的目的: ⑴作为运载工具,将目的基因转移到宿主细 胞中; ⑵利用它在宿主细胞内进行大量的复制。 4.载体的种类: 3、关于限制酶的说法中,正确的是( ) A.限制酶是一种酶,只识别GAATTC碱 基序列 B.EcoRI切割的是G—A之间的氢键 C.限制酶一般不切割自身的DNA分子, 只切割外源DNA D.限制酶只存在于原核生物中 6、(多选)有关基因工程的叙述中,错误的 是( ) A.基因工程技术能定向地改造生物的遗传 性状,培育生物新品种 B.重组DNA的形成在细胞内完成 C.目的基因须由运载体导入受体细胞 D.质粒都可作为运载体 C 4、下列关于限制酶的说法正确的是( ) A、限制酶广泛存在于各种生物中,但微生 物中很少 B、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸 序列 C、不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性 末端 D、限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的 氢键 B 5、以下是两种限制酶切割后形成的DNA片段, 试分析: ①GC… ②AATTC… CG… G… ③ …GC ④ …CTTAA …CG …G ⑴其中①和 是由一种限制酶切割形成的 末端,两者要重组成一个DNA 分子, 所用DNA连接酶通常是 。 ⑵ 和 是由另一种限制酶切割形成的 末端,两者要形成重组DNA片段, 所用的连接酶通常是 。 ③ ② ④ 平 T4 DNA连接酶 黏性 E·coli DNA连接酶 BD * 是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋 予生物以新的遗传特性,从而创造出更符 合人们需要的新的生物类型和生物产品。 一、基因工程的概念 由于基因工程是在DNA分子水平上进行设 计和施工的,因此又叫做DNA重组技术。 原理(实质) 结 果 基本过程 操作水平 操作对象 操作环境 基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状,产生人类需要的基因产物 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 基因重组 转基因抗虫棉 抗虫棉 普通棉 准确切割DNA的工具—— “分子手术刀” DNA片段的连接工具—— “分子缝合针” 基因转移工具—— “分子运输车” 基因的大小以纳米计算,要对它进行剪切、拼接等操作,没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具: DNA重组技术的基本工具 原核生物很容易受到自然界中外源DNA的入侵,但 是长期的进化过程中,这些原核生物却没有因为外源 DNA的入侵而灭绝。 你推测这其中的原因是? 原核生物细胞中的限制酶会将外源DNA切割掉,使之失效,以保证自身的安全,但是不会切割自身的DNA,这是原核生物在长期进化过程中形成的一套防御机制。 1、来源: 主要从原核生物中分离纯化出来 2、种类:约4000种 3、作用: 限制性核酸内切酶能识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 限制酶切割DNA后形成的末端——黏性末端、平末端是如何形成的? 思考: 什么叫黏性末端? 当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时,被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。 什么叫平末端? 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端。 思考 为什么限制酶不剪切细菌本身的DNA? 限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 演示 DNA连接酶── “分子缝合
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