骨髓增生异常综合征患者凋亡造血细胞的克隆性初步研究.pdfVIP

维普资讯 2005年 1月第 26卷第 l期 ChinJHematol，January2005，Vol ． · 39 · · 论 著 · 骨髓增生异常综合征患者凋亡造血细胞 的克隆性初步研究 李晓 沈炜明 浦权 【摘要】 目的 研究骨髓增生异常综合征(MDS)患者凋亡造血细胞的克隆性来源。方法 经过 G带或R带染色体核型分析 ，确定骨髓细胞有异常克隆存在的MDS患者共 19例，其中1O例取骨髓分 离有核细胞制备离心涂片。同步进行 DNA末端原位杂交(ISEL)及相应异常染色体的间期荧光原位 杂交(FISH)(简称 ISEL／FISH法)。计数有核细胞中异常克隆细胞百分比和凋亡细胞中异常克隆细胞 百分比。4名正常人8张离心涂片经 Fas单抗孵育诱导凋亡后行FISH／ISEL检测作为方法学对照。另 9例患者骨髓有核细胞经膜联蛋白V(AnnexinV)及碘化丙锭 (PI)标记染色细胞 ，流式细胞术分选 PI一、AnnexinV PI一、AnnexinV—PI细胞，离心涂片后再行 FISH检测(简称 FCM／FISH法)。结果 1O例经ISEL／FISH分析的MDS患者骨髓有核细胞中异常克隆细胞百分比平均为37．1％，凋亡细胞中 异常克隆细胞百分比仅为24．O％。正常人经 Fas单抗诱导的凋亡细胞核型不变。9例经 FCM／FISH 分析者，8例显示凋亡细胞中核型正常百分比高于非凋亡细胞。结论 MDS凋亡细胞主要来源于残余 正常造血细胞。 【关键词】 骨髓增生异常综合征； 细胞凋亡；克隆细胞 Clonalstudy on single apoptoticcellsin myelodysplastic syndromes LIXiao，SHEN Wei—uring P ， Quan．DepartmentofHematology，theSixthPeople’SHospitalAffiliatedtoJiaotongUniversity，Shanghai 200233，China A【bstract】 Objective Toinvestigatetheclonaloriginoftheapoptotichematopoieticcellsinmyelo— dysplasticsyndromes(MDS)．Methods NineteenpatientswithMDSwhosekaryotypeshadbeenanalysed withG—orR—bindingwerestudied．ISEL(DNAinsituendlabelling)andFISH (fluorescenceinsituhibfid— ization)(simplifiedasISEL／FISH)wereperformedsimultaneouslyinasinglenucleatedcellsoncytospin— slidesin10／19ofthepatients．TheratioofFISH positivecellstoallnucleated cellsaqd toapoptoticcells werecounted．Eightslidesfrom4nomraldonorsinducedapoptosisbyFasmonoclonalantibody(McAb were usedasmethodologycontro1．Fortherest9patients，differentfractionsofcells(PI，AnnexinV PI，An— nexinV Pr )weresortedbyflowcytometryandthencytospinedforFISHanalysis(simplifiedasFCM／ FISH)．ResuIts Themeanpercentageofabnomralclonalcellsinnuclearcellsinthe10casesdetectedbv ISEL／FISH Was 37．1％ ．whereasitwas24．O％ inapoptoticcells．InductionbyFas Mcab didn’tleadto change