象耳豆根结线虫hsp70基因的克隆与原核表达-植物病理学报.pdfVIP

下载本文档

7
0
约1.94万字
约 7页
2017-11-15 发布于天津
举报
版权申诉

象耳豆根结线虫hsp70基因的克隆与原核表达-植物病理学报.pdf

1、有哪些信誉好的足球投注网站（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

植物病理学报ＡＣＴＡＰＨＹＴＯＰＡＴＨＯＬＯＧＩＣＡＳＩＮＩＣＡ　４５(１):７￣１３(２０１５) ｄｏｉ:１０.１３９２６/ｊ.ｃｎｋｉ.ａｐｐｓ.２０１５.０１.００２象耳豆根结线虫Ｈｓｐ７０基因的克隆与原核表达１ꎬ２２２２∗ 练冬梅 ꎬ王会芳 ꎬ赵志祥 ꎬ陈绵才１ ( 海南省农科院农业环境与植物保护研究所/ 海南省植物病虫害防控重点实验室ꎬ海口５７１１００ꎻ ２海南大学环境与植物保护学院ꎬ海口５７１１０１) 摘要:采用ＲＴ￣ＰＣＲ、ｃＤＮＡ末端快速扩增法(ＲＡＣＥ)ꎬ克隆了象耳豆根结线虫Ｈｓｐ７０基因的全长ｃＤＮＡ(ＭｅＨｓｐ７０)序列ꎮ ＭｅＨｓｐ７０ｃＤＮＡ全长２２０３ｂｐꎬ含有１９５９ｂｐ的开放阅读框ꎬ编码６５３个氨基酸ꎬ相对分子量为７１.０９ｋＤａꎬ具有３段Ｈｓｐ７０家族的签名序列ꎬＧｅｎＢａｎｋ登录号ＫＦ７３９４３４ꎮ 同源性分析表明ꎬ氨基酸序列与其他真核生物的Ｈｓｐ７０序列具有很高的相似性ꎮ 该Ｈｓｐ７０与其他物种中的Ｈｓｐ７０进行系统进化分析ꎬ结果显示ꎬＨｓｐ７０的系统发育树不能体现物种间的亲缘关系ꎬ推测其反映的是不同物种间Ｈｓｐ７０生物学功能的相似性程度ꎮ 构建了一个原核表达载体ｐＥＡＳＹ￣Ｅ１￣ＭｅＨｓｐ７０ꎬ当ＩＰＴＧ终浓度为０.４~１.０ｍｍｏｌ/ Ｌ时ꎬ能诱导表达融合蛋白ꎮＭｅＨｓｐ７０基因的克隆和表达ꎬ将为象耳豆根结线虫的生态适应性机理研究提供依据ꎮ 关键词:象耳豆根结线虫ꎻＨｓｐ７０ꎻ克隆ꎻ表达ＣｌｏｎｉｎｇａｎｄｐｒｏｋａｒｙｏｔｉｃｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＨｓｐ７０ｆｒｏｍＭｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅｅｎｔｅｒｏｌｏｂｉｉ　ＬＩＡＮ１ꎬ２２２２１Ｄｏｎｇ￣ｍｅｉ ꎬＷＡＮＧＨｕｉ￣ｆａｎｇ ꎬＺＨＡＯＺｈｉ￣ｘｉａｎｇ ꎬＣＨＥＮＭｉａｎ￣ｃａｉ　 ( ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ＆ＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃ￣ｔｉｏｎꎬＨａｉｎａｎＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＨａｉｎａｎＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＣｏｎｔｒｏｌｏｆＰｌａｎｔＤｉｓｅａｓｅｓａｎｄＩｎｓｅｃｔＰｅｓｔｓ ꎬＨａｉｋｏｕ２５７１１００ꎬＣｈｉｎａꎻ ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｎｄＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎＣｏｌｌｅｇｅꎬＨａｉｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＨａｉｋｏｕ５７１１０１ꎬＣｈｉｎａ) Ａｂｓｔｒａｃｔ: ＴｈｅｆｕｌｌｌｅｎｇｔｈｃＤＮＡ (ＭｅＨｓｐ７０) ｏｆＨｓｐ７０ｆｒｏｍＭｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅｅｎｔｅｒｏｌｏｂｉｉｗａｓｃｌｏｎｅｄｂｙｕｓｉｎｇＲＴ￣ＰＣＲꎬｒａｐｉｄａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｃＤＮＡｅｎｄｓ ( ＲＡＣＥ) . Ｔｈｅｆｕｌｌ￣ｌｅｎｇｔｈｃＤＮＡｏｆＭｅＨｓｐ７０ｗａｓ２２０３ｂｐｃｏｎｔａｉｎｉｎｇａｎｏｐｅｎｒｅａｄｉｎｇｆｒａｍｅ (ＯＲＦ)ｏｆ１９５９ｂｐｅｎｃｏｄｉｎｇａｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｏｆ６５３ａｍｉｎｏａｃｉｄｓｗｉｔｈａｐｒｅｄｉｃ￣ｔｅｄｍｏｌｅｃｕｌａｒｍａｓｓｏｆ７１.０９ｋＤａꎬｗｈｉｃｈｃａｒｒｉｅｄｔｈｒｅｅｉｍｐｏｒｔａｎｔａｎｄｉｎｔａｃｔＨｓｐ７０ｓｉｇｎａｔｕｒｅｓｅｑｕｅｎｃｅｓꎬｗｈｉｃｈｗａｓｒｅｇｉｓｔｅｒｅｄｉｎＧｅｎＢａｎｋｗｉｔｈａｃｃｅｓｓｉｏｎＮｏ.ＫＦ７３９４３４.Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｏｆｓｅｑｕｅｎｃｅｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ￣ａｎａｌｙｓｉｓｒｅｖｅａｌｅｄｔｈａｔｔｈｅｔｒａｎｓｌａｔｅｄｍｏｌｅｃｕｌｅｓｓｈｏｗｅｄｈｉｇｈｈｏｍｏｌｏｇｙｔｏｏｔｈｅｒｅｕｋａｒｙａ.ＴｈｅＨｓｐ７０ｓｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｔｒｅｅｃｏｕｌｄｎｏｔｒｅｆｌｅｃｔｔｈｅｇｅｎｅ