短发夹rna靶向沉默tpx2基因促进人肺腺癌a549细胞凋亡及-tumor.pdfVIP

肿瘤 2011 年 12 月第 31 卷第 12 期　 TUM OR Vol. 31, December 2011　　 1055 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2011.12 .001 Copyright© 2011 by TUM OR 基础研究·Basic Research 短发夹RNA靶向沉默T PX 2基因促进人肺腺癌A 549细胞凋亡及其相 关机制 刘　莹 张　徽 唐　熹 ， ， 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心病理学教研室 重庆　400016 ， [摘要]　 目的：探讨靶 向 Xklp2 靶蛋 白 targeting protein for Xenopus kinesin-like protein 2 TPX 2 基 因的短发 （ ， ） 夹 RNA short hairpin RNA shRNA 对肺腺癌 A549 细胞凋亡 的影 响及其可能机制 方法：构建靶 向TPX 2 基 （ ， ） 。 因的 shRNA 重组 载体 ，将其转染 至肺腺癌 A549 细胞 中，RT-PCR 检测 细胞 中 TPX2 、Aurora-A 、p53 和 Bcl-2 mRNA 的表达 ，蛋 白质 印迹法检测 TPX2 蛋 白的表达 ，FCM 检测细胞周期 和细胞凋亡情况 。结果：成功构建重 组 载 体 pMagic4.1-shRNA-TPX2 。将 pMagic4.1-shRNA-TPX2 转 染 至 A549 细 胞 后 ，TPX2 、Aurora-A 和 Bcl-2 mRNA 的表达水平 明显下调 ，p53 mRNA 的表达水平 明显上调 ，TPX2 蛋 白的表达水平 明显下调 ，细胞凋亡率 明 显增加 细胞 阻滞于 S 期 与空 白对照组 未转染组 和 阴性对照组 转染 pMagic4.1-shRNA-NC 相 比 差异 ， ， （ ） （ ） ， 均有统计学意义 P ＜ 0.05 ）。结论：靶 向TPX 2 的 shRNA 能促进肺腺癌 A549 细胞 的凋亡 其作用可能与上调 （ ， p53 表达和下调 Bcl-2 表达有关 。 [关键词]　肺肿瘤 RNA 干扰 细胞凋亡 基 因 TPX 2 ； ； ； ， [中图分类号]　R734.2 [文献标志码]　A [文章编号]　1000-7431 (2011) 12-1055-06 TPX 2 gene-targeted short hairpin RNA induces the apoptosis of human lung adenocarcinoma A549 cells and its related mechanism LIU Ying, ZHANG Hui, TANG Xi Department of Pathology, Research Centre of Molecular Medicine and Cancer, Chongqing Medical