成肌性标志物在人骨髓间充质干细胞分化为肌细胞过程中的表达.pdfVIP

中 国 医 学 科 学 院 学 报 ＡＣＴＡＡＣＡＤＥＭＩＡＥＭＥＤＩＣＩＮＡＥＳＩＮＩＣＡＥ ·论　著 · 成肌性标志物在人骨髓间充质干细胞分化为 肌细胞过程中的表达 １ １ １ １ ２ 柳太云 ，代　宏 ，林　军 ，李　玫 ，熊　符 ， ２ ２ ２ 冯善伟 ，张亚妮 ，张　成 １贵州省人民医院神经内科，贵阳５５０００２ ２中山大学　第一附属医院神经内科，广州５１００８０ 通信作者：张　成　电话／传真：０２０电子邮件：ｃｈｅｎｇｚｈａｎｇ１００＠ｈｏｔｍａｉｌｃｏｍ 　　摘要：目的　研究成肌性标志物在人骨髓间充质干细胞 （ｈＢＭＭＳＣｓ）分化为肌细胞过程中的表达情况。方法　 体外培养ｈＢＭＭＳＣｓ，采用免疫荧光法和ＲＴＰＣＲ检测ｈＢＭＭＳＣｓ中成肌性标志物ＭｙｏＤ、ｍｙｏｇｅｎｉｎ及ｄｅｓｍｉｎ的表达。将 ７ １×１０个ｈＢＭＭＳＣｓ经尾静脉注入免疫抑制的ｍｄｘ小鼠体内，于移植后２～２４周处死，采用免疫荧光法和ＲＴＰＣＲ检测 小鼠骨骼肌内ＭｙｏＤ、ｍｙｏｇｅｎｉｎ、ｄｅｓｍｉｎ和人特异性抗肌萎缩蛋白 （Ｄｙｓ）的表达。结果　每 １００个ｈＢＭＭＳＣｓ中ＭｙｏＤ、 ｍｙｏｇｅｎｉｎ和ｄｅｓｍｉｎ阳性细胞数分别为２３５±５３、３０７±６２和２８４±５７，第５代ｈＢＭＭＳＣｓ中可检测到ＭｙｏＤ、ｍｙｏ ｇｅｎｉｎ和ｄｅｓｍｉｎｍＲＮＡ表达。ｈＢＭＭＳＣｓ移植后２周，ｍｄｘ小鼠骨骼肌内可检测到少量ＭｙｏＤ和ｍｙｏｇｅｎｉｎ阳性细胞，４周 后可检测到少量ｄｅｓｍｉｎ阳性细胞。ｈＢＭＭＳＣｓ移植后２～４周，骨骼肌中开始出现 ＭｙｏＤ和ｍｙｏｇｅｎｉｎｍＲＮＡ表达，１２～ １６周较强；移植后８周开始出现ｄｅｓｍｉｎｍＲＮＡ表达，１６周后表达渐增强。ｈＢＭＭＳＣｓ移植后４周，ｍｄｘ小鼠骨骼肌肌 膜可见少量人特异性Ｄｙｓ阳性细胞，８周后开始出现 ＤｙｓｍＲＮＡ表达，随着移植后时间延长，Ｄｙｓ表达逐渐增强。结论 　ｈＢＭＭＳＣｓ具有向骨骼肌细胞分化的潜力，能在受体内分化为骨骼肌细胞。在 ｈＢＭＭＳＣｓ分化为肌细胞的过程中， ＭｙｏＤ和ｍｙｏｇｅｎｉｎ表达上调可能发挥了重要作用。 关键词：Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型肌营养不良症；骨髓；间充质干细胞；成肌性标志物 中图分类号：Ｒ７４６２　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１０００５０３Ｘ（２０１０）０５０５１６０５ ＤＯＩ：１０３８８１／ｊｉｓｓｎ１０００５０３Ｘ２０１００５０１０ ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＭｙｏｇｅｎｉｃＭａｒｋｅｒｓｉｎＳｋｅｌｅｔａｌＭｕｓｃｌｅＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆ ＨｕｍａｎＢｏｎｅＭａｒｒｏｗＭｅｓｅｎｃｈｙｍａｌＳｔｅｍＣｅｌｌｓ １ １ １ １ ２ ＬＩＵＴａｉｙｕｎ，ＤＡＩＨｏｎｇ，ＬＩＮＪｕｎ，ＬＩＭｅｉ，ＸＩＯＮＧＦｕ， ２ ２ ２ ＦＥＮＧＳｈａｎｗｅｉ，ＺＨＡＮＧＹａｎｉ，ＺＨＡＮＧ