单克隆抗体CD44-生物素-亲和素技术构建组织工程软骨修复猪膝关节负重区软骨缺损.pdfVIP

生堡塞坠处整苤查!!!兰生!旦箜!!鲞箜!塑垦!也』垦!P坠坚：丛!竺!!!!兰：!!!：!!：盟!：! ·607· ·实验研究· 单克隆抗体CD44一生物素一亲和素技术构建 组织工程软骨修复猪膝关节负重区软骨 缺损 林红周健王会仁沈龙祥郭常安董健 陈峥嵘 【摘要】 目的观察单克隆抗体CD44一生物素(Biotin)一亲和素(Avidin)绑定(CBA)技术，在 体外构建的组织工程软骨移植修复猪膝关节负重区软骨缺损的效果。方法分3组构建组织工程 软骨：常规组：壳聚糖三维支架+软骨细胞；Biotin—Avidin绑定(BA)技术组：生物素+亲和素化壳聚 糖三维支架+软骨细胞；CBA技术组：生物素化单抗CD44+亲和素化壳聚糖三维支架+软骨细胞。 分4组修复猪膝关节负重区软骨全层缺损：A组植入常规组织工程软骨；B组植入BA技术构建的组 织工程软骨；C组植入CBA技术构建的组织工程软骨；D组植入自体软骨。12周后取标本行大体观 blot检测新生软骨组织内的 察并行Moran评分；生物力学方法评估标本弹性模量和刚度；Western Ⅱ型胶原(colⅡ)、聚集蛋白聚糖(aggrecan)目的蛋白含量；对标本行苏木素．伊红染色、甲苯胺蓝染 色并行Wakitani评分。结果Moran大体评分，D组为(4．48±0．23)分，与c组差异无统计学意义 (P0．05)，但优于A、B两组(P0．05)；D组弹性模量为(20．61±2．02)mPa，刚度为(72．28± 6．16)N／ram、col 1I及aggrecan目的蛋白含量比值分别为1．59±0．14和1．44±0．13，均优于其他组 (P0．05)；组织学染色及Wakitani评分均显示D组修复效果较好。结论BA绑定技术比常规接 种方法所构建组织工程软骨对猪膝关节负重区软骨缺损修复效果好，但是比较而言，单克隆抗体 CBA绑定技术所构建组织工程软骨修复效果更佳，虽仍未达到自体移植修复水平。 【关键词】单克隆抗体CD44；生物素；亲和素；组织工程；软骨缺损 forthe load sectionof Constructionoftissue bearing engineeringcartilagedamaged pigknee-joint CD44monodonal Lin by antibody·biotin-avidinbindingtechniqueHong+，ZhouJian，耽昭Hui— Jian，Chen of ren，ShenLongxiang，GuoChang’an，DongZhengrong．+DepartmentOrthopaedics，Zhoag- shan 200032，China Hospital，FudanUniversity，Shanghai author：ChenZhengrong，Email：chen．zhengrong@船一hospital．sh．ca Corresponding Toevaluatetheeffectof defect tissue 【Abstract】Objective repairingcartilageusing engineering withCD44monoclonal invitroandinvivo． cartilage antibody·biotin-avidin(CBA)bindingtechnique MethodsThetissue were anddividedinto3 engineeringcartila