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农业生物技术学报， 年， 第 卷， 第 期， 第 页 2011 19 5 924~931 JournalofAgriculturalBiotechnology,2011,Vol.19,No.5,924~931 研究报告 ALetter 马铃薯腐烂茎线虫类 酰胺多肽基因 Dd flp 1 的克隆与 FMRF ( ) 表达定位分析 ， 1 2 1 2 2 2* 彭焕 胡先奇 黄文坤 贺文婷 彭德 良 1 650201 2 云南农业大学农业生物多样性应用技术国家工程研究中心，昆明 ； 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点 实验室， 北京 100193 * dlpeng@ 通讯作者， 摘 要 植物寄生性线虫类 FMRF 酰胺多肽(FMRFamidelikeneuropeptides,FLPs)在线虫的取食、 分泌、 迁 移入侵和繁殖过程中发挥着重要的作用。本研究根据 EST序列结合 RACE方法， 获得了一个马铃薯腐烂茎 线虫 Ditylenchus des tructor 类 酰胺多肽基因的 全长。 该基因 全长序列为 ， 包括一 ( ) FMRF cDNA cDNA 891bp 个 681bp 的完整开放阅读框， 编码一个包含 227 个氨基酸的蛋白， 预测的分子量为 25.36kD。序列分析表 明，该蛋白 端有一个由 个氨基酸残基组成的信号肽， 端含 个氨基酸的 酰胺肽的特征区， N 43 C 117 FMRF 其中包含有 个 的 肽， 属于典型的 型蛋白， 该基因命名为 Dd flp 1 登录号 5 NFLRFG FLPs FLP1 (GenBank 为 。 系统发育分析表明， 与 自由生活线虫、 动物寄生线虫和其他迁移性植物寄生线虫的 GU198750) DdFLP1 属于同一支， 推测线虫 的进化与其生活习性密切相关。原位杂交结果表明，D d flp 1 在马铃薯腐烂 FLPs FLP 茎线虫的咽神经环、 后膀胱神经节多个细胞特异表达。推测 DDFLP1 主要与马铃薯腐烂茎线虫的取食、 运 动和排泄功能相关。本研究结果将为植物线虫 f lp 基因功能的研究和寻求新的植物寄生线虫防治策略提供 理论依据。 关键词 马铃薯腐烂茎线虫， 类 FMRF酰胺多肽(FLPs)， 基因克隆， 原位杂交 Cloning and Localization Analysis of a Nove
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