高产脂肪酶菌株的筛选鉴定及酶学, 转酯特性.pdfVIP

2014-08-25 DOI: 10.3724/SP.J.1145.2014.01028 / Chin J Appl Environ Biol 2014 20 ( 4 ) : 602-608 应用与环境生物学报 ， * 高产脂肪酶菌株的筛选鉴定及酶学、转酯特性 ** 马抒晗 张玮佳 吴 茜 姜腾飞 乔代蓉 曹 毅 四川大学生命科学学院微生物与代谢工程四川省重点实验室 成都 610065 摘 要 从自然环境中筛选水解酶活高且酶学、转酯特性优良的产脂肪酶菌株，对脂肪酶工业化发酵生产及生物柴油 制备的研究具有重要意义 . 采用罗丹明B平板初筛和摇瓶发酵复筛法，从70份含油脂丰富的样品中筛选产脂肪酶酶活 较高的菌株进行 16S rRNA鉴定，研究其酶学性质；用大孔树脂固定酶，在无溶剂体系中催化橄榄油制备生物柴油，研 . WZ10-3 p-NPP 78.68 U/mL 16S rRNA 究其转酯特性 结果筛选到一株高产脂肪酶的菌株 ，通过 法测得其初始酶活为 ，经 Burkholderia sp. B. stabilis 99%. 48 h 鉴定属于伯克霍尔德氏菌（ ），与 同源性达到 该菌在发酵 时达到产酶高峰，所产脂 50 pH 7.0 70 1 h pH 7-9 . NKA-9 肪酶的最适作用温度为 ℃，最适作用 为 ， ℃下的半衰期可达 ， 为 时稳定性良好 以大孔树脂 和HPD600为载体制备的2种固定化脂肪酶，催化橄榄油生产生物柴油的转酯率均可达到97%. 综合表明，菌株WZ10-3 脂肪酶的初始水解酶活高于大多数野生脂肪酶，热稳定性好且转酯特性优良，有很好的后续研究价值 . 图7 表3 参25 关键词 脂肪酶；菌株筛选与鉴定；酶学性质；转酯；伯克霍尔德氏菌；生物柴油 CLC Q936 : Q556 Lipase-producing strain: isolation, identification, enzymology and * transesterification MA Shuhan, ZHANG Weijia, WU Qian, JIANG Tengfei, QIAO Dairong CAO Yi** Microbiology and Metabolic Engineering Key Laboratory of Sichuan Province, College of Life Sciences, Sichuan University, Chengdu 610065, China