利用4倍和15倍红外物镜对大样品进行FTIR显微镜成像癌-Agilent.PDFVIP

利用 倍和 倍红外物镜对大样品进行 4 15 FTIR 显微镜成像：癌组织切片的案例研究 应用简报 生物医学 作者 Claudia Beleites* ，Jürgen Popp* ， Christoph Krafft*，Mustafa Kansiz† * 德国耶拿光子技术研究院，艾伯特爱 因斯坦街 9 号，07745 † 安捷伦科技公司，澳大利亚有限公司 前言 傅立叶变换红外 (FTIR) 显微镜成像系统由 FTIR 光谱仪、显微镜和焦平面阵列 (FPA) 检测器组合而成。该方法被视为一种强大而灵活的成像工具，广泛用于生 物医药研究、材料科学、艺术品保护和法医学等众多学科。视场 (FOV) 不仅取决 于物镜和其他放大元件的放大倍率，而且还取决于检测器的尺寸。安捷伦提供了 放大倍数为 倍的专利型 物镜，大幅增加了 。 4 IR FOV 当使用典型的 倍放大的 显微镜物镜和 像素的 15 IR 64×64 数据文件大小的考虑因素 FPA 时，Agilent 620 FTIR 显微镜的 FOV 为 350 ×350 µm ， 如图 所示，将 显微镜与 并且每个像素对应于样品平面上 5.5×5.5 µm 的区域。有几 1 Agilent Cary 620 FTIR Agilent 种方法能够获得更大的 FOV ： Cary 670 FTIR 光谱仪相连。全部数据以 4 cm-1 的光谱分 辨率进行采集，样品测量采用 16 次扫描叠加，背景测量为 使用安捷伦特有的 倍 物镜可增加 ，并且利用 32 次扫描叠加（透过空的 窗片）。表 汇总了测量参 • 4 IR FOV CaF2 1 128 128 的 ，单个方块可达 数，图 2 显示了 FPA 方块马赛克的排列布局。对衰减器与 × FPA 2.4×2.4 mm 积分时间进行优化处理，以便于在发生非线性行为之前达 • 可以安装更大的 128×128 像素 FPA 对 700×700 µm 的 到尽可能高的积分时间，这由 FPA 光谱截止值以下的“非 FOV 进行成像，与此同时使用标准 倍物镜可以保持 15 零”检测器响应所决定。 5.5×5.5 µm 的像素尺寸 将一次欠采样 扫描设置为 ，傅立叶变换计算所得 • 顺序采集的 FTIR 图像的马赛克能够在用户选择的 FOV (UDR)