三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体制备以及酶联免疫试剂盒的研究.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAnhuiA ．Sci．2016，44(17)：91—93，104 责任编辑 李菲菲 责任校对 李岩 三 甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体制备以及酶联免疫试剂盒的研究 韩深 ，贾芳芳 ，崔海峰 ，刘萤，鲁亚辉 ，王兆芹 ，桂淦 (1．北京出入境检验检疫局，北京 100026；2．北京勤邦生物技术有限公司，北京 102206；3．北京市食品安全免疫快速检测工程技术研究中心，北京 102206；4．合肥市畜牧水产技术推广中心，安徽合肥230001) 摘要 [目的]探讨系统地检测水质中三甲氧苄氨嘧啶残留量的方法。[方法]通过三甲氧苄氨嘧啶与马来酸酐反应，得到三甲氧苄氨 嘧啶半抗原，再通过免疫动物得到抗三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体，并将其应用于能够检测水质 中三 甲氧苄氨嘧啶残留量的ELISA试剂 盒。 【结果]试验表明，该试剂盒对水质中三甲氧苄氨嘧啶的检测限为2．34 ／kg，，c (50％抑制浓度)为4．8 g／L，回收率为60．5％一 79．7％，试剂盒的标准曲线范围为O一80 g厂L，批内、批间的相对标准偏差均小于10％，三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体与二 甲氧苄氨嘧啶 的交叉反应率小于1％，4℃下能够保存 12个月，稳定性较好。 【结论]研究可为监管三甲氧苄氨嘧啶的滥用提供参考。 关键词 三甲氧苄氨嘧啶 ；单克隆抗体；ELISA试剂盒 中图分类号 TS207．3 文献标识码 A 文章编号 o517—6611(2016)17—091—03 StudyOUtheProductionofTrimethoprem MonoclonalAntibodiesandItsELIsA KitforRapidDetection HANShen。，JIAFang-fang ，CUIHai-feng etal (1．BeijingEntry—ExitInspectionandQuarantineBureau，Beijing100026； 2．BeijingKwinbonBiotechnologyCompany，Beijing102206；3．BeijingEgineeringReserachCentreofFoodSafetyImmunodetection，Beijing lO2206) ‘ Abstract 0『biective]TheaimwastodiscussthemethodfordetectingTrimethopremresiduesinwater． M『ethod】ThesynthesizedTrime． thoprem haptenwaspreparedfrom asequenceofreactionsthatusedTfimethoprem andMaleicanhydride．AndTrimethoprem monoclonalanti． bodieswerepreparedbyanimalimmune．AndEUSA kitwasprepared．Thenthelimitofdetectionandrelativestandarddeviation(兄SD)of trimethopremEusAwasstudied．[Result]Thelimitofdetectionwas2．34 g／kg，withtheIC50values4．8 L．nlerecoverieswerebe— tween6O．5％ 一79．7％ ．Thestandard Curverangedfrom0to80 g／L，andRSDwaslessthan10％ ．Th ecrossreactionratewithDiaveridine waslessthan1％．Thestabilitytestsresultsrevealedthatthekitcanbekeptat4℃ for12months． 『Conclusion11广hestudycanprovideref- ereneeofradministrationoftheabuseofTrime出oprem． Keywords Trimethoprem：Monoelonalantibodies；Enzymelinkedimmunosorbentassaykit(EUSA) 三甲氧苄氨嘧啶(Synaprim，TMP) 属于二氨嘧啶类化 有关于磺胺类药物增效剂的系统