铜离子及对两栖动物的毒性影响.pptVIP

铜离子对两栖动物的毒性影响 （一）急性毒性 1. 观察记录在不同浓度下，中华大蟾蜍和中国林蛙的死亡率，通过半致死剂量来说明这两种物种急性毒性的差别及敏感性程度。 2. 分别取中华大蟾蜍和中国林蛙正常组10只，称量其体重，并解剖取肝脏进行称量，计算这两种物质的肝重/体重的比值，通过比值来说明这两种物种的肝脏解毒能力，来进一步解释说明不同的敏感程度，以及对环境的适应性。 二、游泳行为 在半致死剂量的前提下，获得亚致死浓度和安全浓度。在亚致死浓度范围内，观察这两种物种的游泳行为，参照文献，可分为3种不同的游泳行为：Break、Sinking、Cruising 、每1个小时观察一次，记录蝌蚪这3种行为的百分比。 三、游泳速率 通过观察计算不同浓度组中蝌蚪的游泳速率，来说明不同浓度对蝌蚪的毒性影响。其次比较相同浓度组中中华大蟾蜍和中国林蛙的游泳速率，研究这两种物种对铜离子的敏感程度。 四、遗传毒性 1、通过微核测定的方法检测铜离子是否会对两栖动物引起遗传毒性。微核测定法是一种简便的遗传毒理学方法，目前已较广泛地用来检测和监察各种理化因子对机体的致癌、致突变效应。通过微核测定的方法，检测铜离子诱发中华大蟾蜍和中国林蛙血液中红细胞微核的数目异常情况，说明铜离子造成的遗传毒性。 2、彗星电泳(Comet Assay) ：彗星试验是一种测定和研究单个细胞DNA 链断裂的新电泳技术,该技术是先用琼脂糖凝胶将细胞包埋在载玻片上, 在裂解液作用下, 细胞膜、核膜及其他生物膜破坏, 使细胞内的RNA、蛋白质等通过凝胶扩散到裂解液中, 唯独核DNA 仍保持缠绕的环区(Loop)附着在剩余的核骨架上, 留在原位。如果细胞受到损伤, 电泳即可出现拖尾现象。最后，在荧光显微镜下，观察单细胞电泳图像，每片记数25～50 个细胞, 每个剂量组检查100个细胞。通过观察尾长和尾距来测定DNA的损伤程度。尾长(tail length)即DNA 迁移的长度, 在低损伤剂量范围内与DNA 损伤呈线性关系; 尾矩(tail moment)即尾长与尾部DNA 百分含量之乘积,在高损伤剂量下与损伤程度呈线性关系。 * * 这篇文章的目的是从形态和分子方面共同阐述铜离子对两栖动物的毒性影响。从4个方面去研究铜离子的影响。 3.分别对中华大蟾蜍和中国林蛙皮肤进行组织学观察，研究其皮肤对污染物的渗透能力,进一步阐明 *