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Ⅴ浓缩干燥结晶与保藏
Ⅴ 浓缩、干燥结晶与保藏 重点 浓缩:定义、方式、真空蒸发防酶变性 原因 干燥:定义、方式、与浓缩的比较 结晶:定义、过程、方式、影响条件、 晶体与沉淀区别 一 浓缩 1.定义:使溶液水分部分蒸发,使溶液浓度 增加 2.方式:⑴高温蒸发:易变性 ⑵真空蒸发:真空中不需高温蒸 发,可防酶受热变性 3.影响因素:蒸发面积S↑→蒸发能力↑ T↑→蒸发能力↑ P↓→蒸发能力↑ ※真空蒸发防酶变性原因:真空P=0,不需T大 二 干燥 1.定义:使固体表面水分蒸发,使固体表面 无水 2.方式:⑴真空蒸发:防酶变性 ⑵冷冻干燥:降温到0oC以下,使水结冰, 再抽真空使冰成水蒸气逸出 ⑶喷雾干燥:酶做成粉末,喷入热空气中 快速干燥 ⑷气流干燥:热空气通到固体表面蒸发水 ⑸吸附干燥:加干燥剂吸水 三 结晶 1.定义:使溶质以晶体形式析出 2.过程:形成过饱和溶液→形成晶核→晶核 长大 3.结晶方式:⑴盐析法 ⑵有机溶剂法 ⑶透析平衡法 ⑷等电点法 4.影响条件:⑴纯度达50%以上才能结晶 ⑵浓度达一定值才能结晶,但 浓度太大晶核不长大→要控 制溶液浓度 ⑶不易结晶溶液需加晶种促结晶 ⑷温度要低(高温溶解度大) PH要趋近于PI(原因见生化) 离子强度要低(使酶带电荷少,同 电相斥作用减小) ※晶体与沉淀的区别 晶体:晶格规则 沉淀:晶格不规则 可用沉淀的方法使溶液析出晶体 ※浓缩与干燥总结 ※真空蒸发防酶变性原因: 真空P=0,又P↓→蒸发能力↑,所以不需T 大,防酶受热变性 四 酶制剂的保藏 1.液体酶:发酵液(溶有酶)直接灭菌 2.固体粗酶:发酵液浓缩、干燥、结晶后所 得,利于保存和运输 3.纯酶:发酵液经过分离纯化后所得,用于 医疗事业 4.固定化酶: ※酶保藏条件:0-10oC,合适PH * * ※原因见3.影响因素 原因同浓缩 原因见生化 结晶与沉淀区别 固定化酶
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