遗传学实验参考(201100915稍改).pdf

《遗传学》实验参考 福建农林大学园艺植物遗传育种教研室 目 录 实验一 植物细胞染色体制片与有丝分裂过程的观察 1 实验二 核型分析 4 实验三 细胞减数分裂制片与减数分裂过程的观察 8 实验四 植物组织DNA 的粗提 11 实验五 永久制片方法 15 实验六 植物染色体结构变异的观察 18 实验七 农杆菌介导的遗传转化方法 20 实验一 植物细胞染色体制片与有丝分裂过程的观察 一、实验目的 通过对植物组织的取材、预处理、解离、染色、压片 等制片步骤的学习，掌握植物制片技术，奠定细胞遗传学 的研究技术； 通过对植物根尖细胞的观察，掌握有丝分裂过程中染 色体的形态特征。 二、实验原理 熟悉有丝分裂过程、掌握有丝分裂染色体制片方法与 技术是研究染色体形态结构、检查染色体数目、进行核型 分析与带型分析的基础。 有丝分裂是生物体细胞增殖的主要方式。在有丝分裂 过程中，细胞核内染色体能准确地复制，并能有规律地、 均匀地分配到两个子细胞中去。细胞有丝分裂可分为前 期、中期、后期、末期四个时期。 高等植物有丝分裂主要发生在根尖、茎尖生长点及幼 叶等器官的分生组织，这些分生组织均可以用作制片材 料；另外愈伤组织、悬浮培养物等分生组织也可用作制片 材料。 植物细胞的细胞壁对细胞形态和结构起支撑和保护作 用，分生组织的细胞壁结构将分生细胞结合成一个整体， 因此在压片之前需要采用适当方法软化或部分分解细胞壁 使细胞间易于分离，这一操作称为解离。同时，解离也可 适当清除部分细胞质，使细胞质背景趋于透明化，便于观 . . 1 察染色体。常用的解离方法主要有酸解法和酶解法，还有 碱法。 三、实验材料、用具和药品 水仙(2n=30)根尖，显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、 8-羟基喹啉、盐酸、苏木精、铁矾、纱布、滤纸等。 四、实验方法 ．发根 通过休眠的水仙鳞茎，置于盛有清水的小烧 1 杯上，根部与水接触， ～ ℃培养 ～ 天，待根长 20 25 2 3 ～ 时，于上午 ～ 剪下根尖