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第一次LC-其他类型
其他类型⾼效液相⾊谱法
黄寅 药学院 药物分析教研室
huangyincpu@
离⼦交换(ion exchange chromatography )
尺⼨排阻(size exclusion chromatography )
制备⾼效液相(preparative HPLC )
⼿性⾼效液相 (chiral HPLC )
⼀、离⼦交换⾊谱法
1.定义
Ion exchange chromatography
(usually referred to as ion
chromatography) uses an ion
exchange mechanism to separate
analytes based on their respective
charges.
It can be used for almost any kind of
charged molecule including large
proteins, small nucleotides and
amino acids.
采⽤⾼分⼦聚合物为基质的离⼦交换
树脂(ion-exchange resin )或离⼦交
换键合相为固定相。
书P184
2. 固定相及分离机理
固定相组成及特点:
•基质:薄壳型或全多孔微粒硅胶。
•优点:具有较⾼的耐压性;化学及热稳定性;有较好的机械
强度,耐压;可以⾼压匀浆装柱。
•缺点:pH适⽤范围只能在pH 2 ~8 ;pH >9时,硅胶便容易
溶解,未键合的残留硅羟基易⽣成硅酸盐。
离⼦交换容量:
•单位质量的离⼦交换剂所能与其它离⼦发⽣交换的量;
•交换容量越⼤,负载能⼒越⼤,k值也越⼤;
•离⼦交换键合相的交换容量与固定相的表⾯积直接有关。
书P185
分离机理:
•固定相中存在许多可以电离的活性中⼼,待分离组分中的离⼦会与这些
活性中⼼发⽣离⼦交换,形成离⼦交换平衡;
•溶质的保留兼有离⼦交换和吸附双重机制。
-
阳离⼦交换剂(R )
:磺酸基(-SO H)、
3
羧酸基(-COOH)
+ - + + - +
(1)阳离⼦交换: BH + R M BH R + M
- + - - + -
(2 )阴离⼦交换: A + R N A R + N
+
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