Odyssey 红外荧光扫描成像系统培训手册1.pdf

Odyssey 红外荧光扫描成像系统 培训手册 二 oo 三 年 九 月 目 录 一、Odyssey 红外成像系统技术特点 二、系统安装条件 三、Western 实验所需试剂设备及样品 四、培训程序及时间安排 五、仪器及试剂系统介绍 六、Western 实验操作流程介绍 七、软件使用培训 八、常见问题处理 九、注意事项 一、Odyssey 红外成像系统技术特点 一般的荧光染料的激发和检测波长都位于可见光谱区，在此波长范围内，化 学高分子物质（膜、胶、微孔塑料板等）也会发出荧光，因此易产生高背景的荧 光干扰，从而不能有效用于膜上蛋白或者核酸的直接荧光成像。而在红外波长区 这些大分子物质几乎不发出任何荧光信号，使得红外荧光染料在长波下检测时背 景荧光很低，具有很好的信噪比，这一特点使得核酸和蛋白的膜上荧光检测成为 可能。LI-COR 根据红外荧光的这一特点开发出 Odyssey 红外成像系统，独特的 采用2个红外激光作为激发光源，以扫描成像方式对样品进行检测。样品载体可 以是膜、凝胶和微孔板。该系统配置的2个红外激光激发光源，激发光波长分别 为680nm和780nm，配置的2个高灵敏度光敏二极管可以分别检测720nm和820nm 的发射荧光，因而Odyssey 可同时检测两种 IRDyes 染料的荧光信号。IRDyes 染 料的最大吸收值与 Odyssey 的两个红外激光器680nm 和 780nm 激发波长相匹配， 其发射光波长又与Odyssey 的两个光敏二极管检测波长相匹配，与同时IRDye700 和 IRDye800 的发射波长峰值相隔 100nm，因此 Odyssey 可以给出最大的灵敏度 和最小的信号交叉。同时由于采用二极管激光器和固态检测器，Odyssey 具有很 长的使用寿命（激光器使用寿命约 4-6 万小时），而系统维护的要求却很低。该 系统可广泛应用于信号传导，蛋白磷酸化分析，In-Cell-Western 分析等蛋白领域 研究。 主要特点 1．高灵敏度,效果同于或者好于化学发光法，但不需信号放大步骤，信噪比高。 2．直接检测，无需曝光和显色底物，不需要 X 光片，不需要暗房，没有放射性 废料产生。 3．双色检测，可以在一次杂交中同时检测两种目的分子，直观，省时。 4