Ser84是spindlinl定位与功能发挥的关键位点.pdfVIP

Research Papers PI臼；!豢孺嚣乞…记s WWW．pibb．ac．ca 丛斌”张鹏”王静雪 曾 泉陈琳岳文…裴雪涛… (军事医学科学院野战输血研究所干细胞与再生医学研究室，北京100850) 的关系，在生物信息学分析及晶体结构解析的基础上，构建系列突变表达载体，首先以spindlinl蛋白弧细胞定位为指标， 关键词spindlinl，突变，细胞定位，TCF-4 学科分类号Q291 DOI：10．3724／SP．J．1206．2008．00365 卵母细胞的发育与成熟一直是生命研究的重 spindlinl的表达可以引起细胞丝裂灾变以及染色体 点，对此过程中相关蛋白质功能的研究将有助于深 入了解生命起始本质．自20世纪70年代以来，越 cellfactor 来越多的研究关注精子、卵母细胞以及受精卵早期 (T 4，TCF4)通路的调节发挥其对细胞周 发育相关蛋白质【-吲．其中，一个30ku的蛋白质 期的调控作用．为更深入了解spindlinl功能和作 在多个研究小组的报道中出现，1997年Bermseok 用机制，我们原核表达spindlinl蛋白，纯化后制 小组在对小鼠卵母细胞发育过程进行研究时将其分 备晶体，并对其晶体结构进行分析．结果表明， 离并：命名为sDindlin．研究表明，小鼠spindlin蛋 白表达具有时空特异性，在减数分裂过程中与纺锤 重复结构域，每个结构域都由4--一5个反向平行的 体密切相关，表达随着卵母细胞成熟过程逐渐增 p折叠构成【171．在此基础上，通过模建、突变与探 高．在2细胞时期开始降低，随着受精卵发育其表 讨蛋白质之问的相互作用等方法，确认影响蛋白质 定位与功能的关键氨基酸位点无疑是进一步研究的 达逐渐消失．鼠spindlin蛋白可作为MOS／MAPK 的作用底物被信号通路中被磷酸化修饰后发挥作 重要内容． 用f7删．之后文献陆续报道spindlin在鸟类、鱼类等本研究中在生物信息学和蛋白质晶体结构解析 生殖细胞中表达，与精子发生期特异转录子Ssty基础上，构建spindlinl系列突变体，首先以蛋白 Ⅳ-linked spermiogenesisspecifictranscript)共同组成 一个进化高度保守的与生殖细胞发育密切相关的 Spin／Ssty家族【m121． 研究发展规划(973X2005CB522702)资助项日． 我们研究小组最早从人卵巢癌细胞中克隆获得 一共同第一作者． ¨。通讯联系人．Tel：010Olo 了与鼠s口indli凡基因高度同源的基因并命名为 岳文．E-mail：wenyue26@yahoo．corll spindlinltl3141．前期研究结果表明，spindlinl定位 裴雪涛．E—mail：peixt@nic．bmi．ac．cn 于细胞核，为参与细胞周期调控的核蛋白，外源性 收稿日期：2008．05—19，接受日期：2008-08．19 ·176- 生物化学与生物物理进展Prog．Biochem．Biophys． 2009；36(2) 质亚细胞定位作为其功能变化的直观标示，确定在 ACAC’几’GG，Reverse：5’ CGGCGAT