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PNRC1核定位信号序列的鉴定.pdf

ISSN1007.7626 中国生物化学与分子生物学报 2008年1月 CN1 1-3870/Q Chinese of andMolecular 24(1):35~39 Journal Biochemistry BiologY PNRCl核定位信号序列的鉴定 王元忠, 李渝萍, 陈 敏, 陈 彬, 陈 健, 周度金。 (第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,重庆400038) 摘要 localization 为鉴定富含脯氨酸核受体辅调节蛋白1(PNRCl)分子的核定位信号序列(nuclear signal PNRCl突变体的绿色荧光蛋白(GFP)重组表达载体,转染细胞后通过激光共聚焦显微镜观察 达载体上,以及将预测的NLS加到胞浆蛋白上构建其GFP重组表达载体,转染细胞,观察预测的 NLS能否把构建的重组体都带到细胞核内.结果显示,删除PNRCl中预测的NLS后,其定位从细胞 核中变为主要定位在细胞浆中,而预测的NIS能把GFP或胞浆中的蛋白带到细胞核中.研究表明, 预测的NLS为PNRCl分子真正的NIJS. 关键词 富含脯氨酸核受体辅调节蛋白l;核定位信号序列;辅活化子;绿色荧光蛋白 中图分类号Q78 IdentificationofNuclearLocalization ofPNRCl SignalSequence WANG Min,CHENBin,CHENJian,ZHOUDu.Jin‘ Yuan—Zhong,LIYu—Ping,CHEN andMolecular Medical (Department旷BiochemistryBiology,ThirdMilitary University,C幻,御i粥400038,China) Abstract’ronuclearlocalization nuclear identify signalsequence(NLS)ofproline—richreceptorcoregulator l(PNRCl),vectorsfluorescence PNRCland protein expressinggreen protein(GFP)-taggedGFP—tagged PNRClmutantwiththe NIS(aa94.101,PKKRRKKK)deletionwere thentransfectedinto putative generated mamaaliancells.ThesubcellularlocalizationofPNRC1 and NISdeletedPNRC1 wereexamined putative by confoeal addition,recombinants NLSand microscope.In putative expressingGFP—tagged GFP-tagged

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