梅花鹿新鲜与冷冻胚胎移植获得后代.PDFVIP

梅花鹿新鲜和冷冻胚胎移植获得后代 1,2 2 3 1 1 王 梁 史文清 史建民 朱士恩 刘国世 * （1.中国农业大学动物科技学院 北京 100193 ；2.北京市畜牧兽医总站 北京 100107 ； 3.全国畜牧总站畜禽牧草种质资源保存利用中心 北京 100193 ） The Successful Embryo Trans fer of the Fresh and Vitrified/Warmed Embryos of Sika Deer WANG Liang1,2 SHI Wen-qing1,2 SHI Jian-min3 ZHU Shi-en1 LIU Guo-shi1* （1.College of Animal Science and Technology, China Agricultural University Beijing 100193;2.Animal Husbandry and Veterinary Station of Beijing Beijing 100107;3.National Center of Preservation and Utilization of Genetic Resources of Animal and Forage Beijing 100193 ） 摘要：本试验对 12 头供体母鹿进行了超数排卵，27 头受体同期发情后进行胚胎移植，以建 立梅花鹿胚胎移植技术体系。同期发情经埋置 CIDR 处理，超数排卵的供体每头分 8 次注射 总剂量 320 毫克的 FSH。供体发情鉴定后 8～12 小时通过直肠把握法进行人工授精。冲胚时 的胚胎回收率为 74.39% （61/82 ），所获胚胎中，囊胚、桑葚胚、2-细胞、未受精卵所占的 比例分别为 1.64% （1/61 ）、77.05% （49/61 ）和1.64% （1/61 ）、19.67% （12/61）。本研究将 20 枚新鲜胚胎移植给 14 头受体；将 28 枚胚胎经细管法玻璃化冷冻、解冻后移植给 13 头受 体。鲜胚移植的受体妊娠率为 85.71% （12/14 ），产仔率为 64.29% （9/14 ）；冻胚移植的受体 妊娠率为 61.54% （8/13 ），产仔率为 53.85% （7/13 ），二者没有显著性差异 （P ＞0.05）。 关键词：梅花鹿；超数排卵；胚胎移植；胚胎冷冻；妊娠诊断； 梅花鹿因其产茸量高且茸质好而闻名世界，但因其属于单胎动物，季节性发情，而且产 茸量个体间差异很大，高产鹿数量也很少，造成了目前良种扩繁工作的难度较大。因此，采 用先进的繁殖生物技术对其种群进行改良和扩繁显得尤为重要。 鹿的胚胎移植最早在白尾鹿上报道，通过手术法胚胎移植获得了成功，随后该技术又成 功地应用于马鹿、黇鹿和麋鹿。经过几十年的发展，马鹿上超数排卵和胚胎移植（MOET ） 方案已经得到改进并成功地进行了商业化应用。然而，该技术在梅花鹿上还没有得到应用， 相关研究亟待进行。 胚胎的冷冻保存是促进有价值的遗传信息有效保存、运输和传播的相关技术。最早在马 鹿上应用胚胎冷冻的研究运用的是胚胎慢速冷冻法，利用的冷冻保护剂是甘油。快速冷冻法 在解冻后不需要稀释液和冷冻仪的使用，更为便捷，有利于胚胎超低温冷冻保存的应用。本 研究的另一个目的是将细管法胚胎玻璃化冷冻技术应用到梅花鹿的胚胎保存上，并验证其效 率。 我们从同期发情、超数排卵方案的确定，到胚胎的手术法收集、细管法胚胎玻璃化冷冻， 以及内窥镜法胚胎移植等技术的成功应用，初步建立了梅花鹿胚胎移植的技术方案，相信该 技术会成为梅花鹿良种扩繁和野生鹿保种工作的有效技术手段。 1 材料与方法 1.1 动物 供体和受体母鹿的挑选：我们挑选了14 头供体母鹿和38 头受体母鹿，年龄在3~5 周岁， 饲养地点位于北京市怀柔区绿神鹿业有限责任公司的茸鹿养殖场。 种公鹿：供体人工授精所用精液为高产梅花鹿的细管冻精。 试情公鹿：挑选性欲强、性情温顺的梅花鹿成年公鹿作为试情公鹿。 1.2 同期发情与超数排卵 同期发情处理使用羊用的CIDR （Controlled Internal Drug