血管紧张素域2型受体抑制小鼠骨髓源树突状细胞-中国动脉硬化杂志.PDF

CN43鄄1262/ R摇 中国动脉硬化杂志2015年第23卷第9期 881 [文章编号]摇 1007鄄3949(2015)23鄄09鄄0881鄄06 ·实验研究 · 血管紧张素域2型受体抑制小鼠骨髓源 树突状细胞的成熟及活化 1 1 1 1 1 1 1 2 1 唐 兵 ,速晓华 ,陈劲松 ,李 刚 ,杨大春 ,杨永健 ,朱 峻 ,李兴科 ,李 德 (1.成都军区总医院心血管内科,四川省成都市610038;2.重庆大江医院检验科,重庆市401321) [关键词]摇 血管紧张素域2型受体;摇 基因转染;摇 树突状细胞;摇 细胞成熟;摇 动脉粥样硬化 [摘摇 要]摇 目的摇 研究血管紧张素域2 型受体(AT2R)体外基因转染对小鼠骨髓源树突状细胞(BMDC)成熟活化 及部分免疫功能的影响,探讨AT2R参与动脉粥样硬化斑块进展的免疫机制。 方法摇 取C57BL/ 6J 小鼠骨髓,经分 离、纯化、分化为BMDC,先转染带有绿色荧光蛋白报告基因的AT2R基因重组腺病毒载体(pAdCMV/ AT2R)或空病 毒载体(pAd鄄GFP),再用脂多糖刺激为成熟BMDC,分PBS 对照组、脂多糖组、pAd鄄GFP 组、pAdCMV/ AT2R 组及 pAdCMV/ AT2R+PD123319组。 采用RT鄄PCR、免疫荧光和激光共聚焦技术方法检测BMDC 中AT2RmRNA及蛋白 表达;流式细胞术检测BMDC表面标志CD86和MHC域的表达率;液体闪烁计数检测BMDC刺激同源T淋巴细胞 增殖的能力;ELISA 法检测培养基中白细胞介素12(IL鄄12)和酌 干扰素(IFN酌)的水平。 结果摇 pAdCMV/ AT2R 转 染BMDC后48~72 h有AT2R mRNA表达,在激光共聚焦显微镜下胞浆及胞核有绿色荧光表达;同时在胞浆有红 色荧光AT2R表达。 与PBS对照组比较,pAdCMV/ AT2R组和pAdCMV/ AT2R+PD123319 组CD86 和MHC域的表 达、同源T淋巴细胞增殖和细胞因子分泌量都显著升高(P0.01),但pAdCMV/ AT2R组与脂多糖组比较显著降低 (P0.01或P0.05),而pAdCMV/ AT2R+PD123319组与脂多糖组比较差异无显著性(P 0.05)。 结论摇 体外 基因转染BMDC能表达AT2R,AT2R能抑制BMDC成熟诱导的局部免疫炎性反应,且AT2R拮抗剂能阻断此效应, 推测AT2R可能介导稳定斑块及抑制动脉粥样斑块进展的作用。 [中图分类号]摇 R363 [文献标识码]摇 A Angiotensin 域Type2 Receptor Gene Transfection Inhibit Maturation of Bone Mar鄄 row Derived Dendritic Cells from Mice in Vitro TANG Bing,SU Xiao鄄Hua,CHENJing鄄Song,LI Gang,YANGDa鄄Chun,YANGYong鄄Jian,ZHUJun,LIXing鄄Ke,and LI De (Department of Cardiology,GeneralHospitalof PLA ChengduMilitaryArea Command,Chengdu,Sichuan610038,China) [KEYWORDS]摇 Angiotensin 域Type2 Receptor;摇 GeneTransfection;摇 DendriticCells;摇 CellMaturation;摇 Athero鄄 sclerosis [ABSTRACT]摇 摇 Aim摇 To investigate