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ThinPrep2000检测系统在妇产科临床应用
ThinPrep2000检测系统在妇产科临床应用
【关键词】 阴道涂片;细胞学技术;宫颈肿瘤;宫颈上皮内瘤样病变/早期诊断
宫颈癌居世界妇女恶性肿瘤第二位,是发展中国家癌症患者死亡的首要原因。目前世界上死于宫颈癌的患者80%在发展中国家[1],从宫颈上皮内瘤变(CIN)发展成为宫颈癌是一个较长的过程[2],因此,CIN的早期诊断对降低宫颈癌的发生率具有重要的意义。巴氏涂片细胞学作为宫颈癌的筛查方法已有半个多世纪的历史,它的运用明显降低了宫颈癌的病死率,但巴氏涂片细胞学检查存在的假阴性率至少为15%~20%[3],针对巴氏涂片存在的问题,伴随着自动化技术的发展,人们对细胞学的样本采集、制片技术及诊断程序不断进行改进,一系列新的技术应运而生,笔者着重评价对我国产生影响较大的有代表细胞学新技术的ThinPrep 2000检测(TCT)系统。
1 ThinPrep 2000的基本检测程序
1.1 系统的构成 ThinPrep 2000处理仪,扫帚样采集器,样品保存瓶及保存液,过滤器,玻片。
1.2 标本采集 临床医师在诊室用扫帚样采集器按常规方法采集宫颈脱落细胞样本,但并不是直接涂在玻片上,而是把采集器前端放入装有细胞保存液专用瓶子中漂洗,细胞被直接收集到含有甲醇的保存液中,在室温下细胞在保存液中可以保存3周,在2℃~8℃保存时间则更长。细胞标本瓶被送到细胞实验室后,采用ThinPrep 2000全自动处理仪进行制片。
1.3 细胞混匀 上机之前在细胞标本瓶内置入一个长6cm、直径2cm、顶端有过滤膜的圆柱型过滤器。整个标本瓶连同过滤器被置于ThinPrep 2000处理仪内,机轴带动过滤器在瓶内转动而使液体旋动,以分散粘液、混匀细胞,但又很柔和而不会损伤细胞,并足以保持成团的细胞如宫颈管细胞或化生细胞团不被打散。
1.4 细胞的负压过滤膜采集 细胞混匀后,过滤器停止转动,负压管开始抽吸,液体通过滤膜进入过滤器,细胞贴附在过滤膜的外表面,滤膜上均匀分布着直径为8μ的微孔,足以保证细胞成分甚至粘滞在一起的念珠菌孢子等不被滤过,ThinPrep 2000处理仪计算机软件通过监测过滤器内的液体流速来控制负压抽吸过程。
1.5 细胞转移 当过滤膜被细胞覆盖后,过滤器自动提起并翻转180°与其上方预置的玻片相对,当滤膜与玻片接触时,依靠过滤器内微弱的正压和玻片与细胞间正、负电荷作用,滤膜上的细胞被转移到玻片上,在界定位置内形成一个直径为2cm的细胞薄层,然后玻片被自动放进一个装有95%酒精的小瓶子里立即固定。每小时约可处理30份标本,人工巴氏染色,光学显微镜下观察细胞形态结构。该方法制成的细胞膜片具有传统巴氏涂片无法比拟的优点,有文献报道[4],ThinPrep 2000检测液基细胞学和巴氏细胞学分别检出鳞状细胞癌(SCC)100%、80%,鳞状上皮内高度病变(HSIL)91.0%、71.8%,鳞状上皮内低度病变(LSIL)72.1%、51.5%,两者诊断HSIL或以上的准确率分别为91.6%和72.3%。ThinPrep 2000检测系统液基细胞学检查敏感性高于巴氏细胞学,能提高检出率,特别是宫颈癌早期和HSIL。因此,ThinPrep 2000技术可替代传统巴氏涂片,该技术的应用能提高LSIL和HSIL的检出率。
此外,ThinPrep 2000检测系统的样本保存液还可以较好地保留细胞的DNA信息,FDA认证中批准ThinPrep 2000的患者样本可以被直接用于进一步的HPV的DNA测试。
2 ThinPrep 2000技术检测的敏感性
ThinPrep 2000技术由于改善了样本的收集率,并使细胞均匀分布在玻片上,提高了发现LSIL和HSIL的敏感度[5],尤其是高度病变,用ThinPrep 2000检测系统液基细胞学可检出92.9%的高度病变和100%的癌瘤,与传统巴氏涂片的77.8%和90.9%相比差异具有显著性[6],ThinPrep 2000检测系统液基细胞学对识别高度以上病变的灵敏度和特异性分别为87%和94%[7],宋志琴等[8]也报道ThinPrep 2000检测系统液基细胞学的敏感度与阳性预测值分别为97.32%和83.89% ,并且显著降低了标本的不满意率。
3 ThinPrep 2000技术制片与传统巴氏涂片的比较
在传统巴氏涂片中,53%~90%假阴性的原因是涂片中没有能诊断的细胞[9],主要有两个原因:其一,80%以上的细胞随取样器而丢失[10],没有被转移到载玻片上;其二,涂片质量差,不均匀、过厚、过多的粘液、血液或炎细胞遮盖了异常的细胞。有文献报道[9],有40%的涂片因涂片质量而影响正确诊断,而ThinPrep 2000检测系统却能很好地解决了
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