C12多种肿瘤标志物蛋白芯片对食管癌转移及预后探究.docVIP

C12多种肿瘤标志物蛋白芯片对食管癌转移及预后探究 　 作者：冯笑山， 单探幽， 高社干， 曲智峰， 王战会， 张洛， 韩晶 【关键词】 肿瘤标志物；蛋白芯片；食管癌；转移；预后 　　肿瘤标志物（Tumor marker, TM）是指在恶性肿瘤的发生和增殖过程中，由肿瘤细胞的基因表达而合成分泌的或是由机体对肿瘤反应而异常产生或升高的，反映肿瘤存在和生长的一类物质[1]。多种TM蛋白芯片（C12系统）技术是基于双抗体夹心法的化学发光检验技术，对TM进行定量检测[2]。食管癌患者病情变化及预后的评估目前尚缺乏明确的指标。我们对113例食管癌患者进行了检测，并对其预后进行了随访，现将其报道如下： 　　1资料与方法 　　1.1标本来源收集2003年4月~2004年6月河南科技大学第一附属医院113例食管鳞癌患者血清。平均年龄63.7岁，年龄范围38～87岁。男88例，女25例。其中淋巴结转移和（或）脏器转移40例，无转移73例。随访2年，32例死亡，73例存活，失访8例。 　　1.2仪器和试剂仪器为上海数康生物科技有限公司生产的HD2001A型生物芯片检测仪，试剂为其生产的C12肿瘤诊断用蛋白芯片试剂盒。 　　1.3检测方法 采集患者空腹不抗凝静脉血2ml，分离血清，取待检血清或倍比稀释的标准品各100μl，滴加到芯片分格内，37℃孵育振荡30min，弃去液体；用洗涤液洗涤芯片，37℃振荡洗涤8min，共4次；加反应液100μl，37℃孵育振荡30min，弃去液体；洗涤液洗涤芯片4次；在每个芯片膜表面加检测液A和B混合液20μl，静置1min；用HD2001A生物芯片检测仪对蛋白芯片成像、读取数据、作标准曲线、分析打印结果。 　　1.4结果判读各项目正常参考值为： CA199lt;35U/ml， NSElt;13ng/ml， CEAlt;5ng/ml， CA242lt;20U/ml， Ferlt;219ng/ml， βHCGlt;3ng/ml， AFPlt;20ng/ml， fPSAlt;1ng/ml， PSAlt;5ng/ml， CA 125lt;35U/ml， HCGlt;75ng/ml， CA153lt;35U/ml。 检测数值高于正常参考值为阳性。 　　1.5统计学处理统计软件采用SPSS11.0版本，组间阳性率比较用χ2检验。 　　2结果 　　2.1113例食管癌患者TM单项在转移组和未转移组的表达情况，见表1。 　　表1转移组和未转移组TM单项表达情况（略） 　　 　　2.2转移组40例中25例检测结果阳性，阳性率为62.5%；未转移组73例患者中5例阳性，阳性率为6.9%。统计学处理，χ2检验结果显示转移组的阳性率明显高于未转移组（Plt;0.001）。 　　　2.3随访发现30例检测结果阳性患者中14例死亡，失访3例，死亡率为51.9%；83例检测结果阴性患者中18例死亡，失访5例，死亡率为23.1%，见表2，统计学处理，χ2检验结果显示P=0.005（Ｐlt;0.01），差异具有统计学意义。 　　表2TM阳性组患者死亡率与阴性组患者死亡率比较（略） 　　 　　2.4检测系统结果显示，7例患者血清TM 3项以上阳性，随访两年死亡6例，1例患者病情危重，正接受治疗，死亡率为85.7%（6/7）。 　　3讨论 　　食管癌是我国常见的恶性肿瘤之一，对其临床分期及预后的正确判断是临床医师采取合理治疗方案的重要依据。自20世纪60~70年代发现甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）并在临床上得到应用以来，TM检测已经成为常规的肿瘤检测手段之一，为肿瘤的诊断和疗效观察起到一定的作用。目前肿瘤标记物的种类已达百余种，但至今仍没有一种理想的标志物可用于临床上作为食管癌转移和预后判断的指标[3]。单一标志物检测始终存在着特异性不强、阳性率较低等不足[4]。C12系统为近年来发展起来的一项新技术，具有高通量、高灵敏度、高特异性和微量化的优点[5]，作为肿瘤诊断的一种方法广泛应用于临床，与单一TM相比对肿瘤诊断的敏感性和特异度均明显提高。本实验采用的C12系统对113例食管癌患者进行转移及预后研究，检测结果显示：转移组的阳性率为62.5%，明显高于未转移组6.9%。随访结果显示：标志物阳性患者的2年死亡率为51.9%，明显高于标志物阴性患者23.1%。提示TM联合检测在食管癌的转移及其预后的评估具有重要意义，可以作为临床判断食管癌转移及预后评估的方法。可以为临床医师不同阶段肿瘤患者治疗方案的选择及预后的判定提供线索。并且TM阳性的数目与患者的预后密切相关，阳性数目越多死亡率越高，三项以上TM阳性患者的两年死亡率高达85.7%。本研究还发现食管癌患者未转移组患者（大部分为临床分期较早的I、II期患者）的阳性率为6.9%