枯草芽孢杆菌产蛋白酶菌株的培育及产酶能力大小的测定 - 世界大学城.docVIP

　 　 　　 　　 　　　 　 论 文　　　 　 　　　 题 目: 枯草芽孢杆菌产蛋白酶菌株的培育及产酶能力大小的测定　　 　　 　　 院系名称: 湖南化工职业技术学院应用化学系 　　　 　 　 专业班级: 生物化工工艺 　　　 　 　　　 学生姓名: 江伟清 　 　 　　 学 号: 201012020108 　　 　　 指导老师: 罗跃中 　 　　 　　 　 摘 要　 本试验研究了不同的碳源、氮源、pH、碳氮比对枯草芽孢杆菌发酵产蛋白酶的影响，并运用了单因子分析确定了最佳碳源为黄豆粉，氮源为玉米粉来进行枯草芽孢杆菌发酵生产蛋白酶。　　　 　　　 关键词：枯草芽孢杆菌；单因子分析；蛋白酶；产酶条件；　　　 　　 　 　 　　　 　　　 　　　 　　 　 　 　　 　 　　　 　　　 　 　　　 　 　　　 　 　　 　 　 　　 　 　　 目 录　 摘 要 　 Abstract 　　 第一章 前言 　　　 1 蛋白酶的概况： 　　 2 国内外酶制剂的生产和应用现状 　　 3 酶在生产和生活中的应用 　 4枯草芽孢杆菌的概况　　 5枯草芽孢杆菌的应用　 第二章 材料 　　 1 菌株 　 2 培养基 　 2.1 斜面培养基 　　　 2.2 发酵培养基 　　 3 主要仪器 　　　 4 主要试剂 　　　 第三章 方法 　　　 1 培养菌种方法 　　　 2 粗酶液获得方法 　 3 淀粉酶测定的方法 　　 3.1试剂的配制 　　 3.2 淀粉酶活力测定的方法 　 3.3结果计算 　　 3.4 产酶条件优化 　 第四章 结果与分析 　　 1 葡萄糖标准曲线的绘制 　 2 温度对产酶的影响 　　 第五章 结论与讨论 　　　 参考文献 　　 致 谢 　　 　 　 第一章 前言　　 　　　 1 蛋白酶的概况：　　 蛋白酶（protease ）：水解蛋白质肽键的一类酶的总称。按其水解多肽的方式，可以将其分为内肽酶和外肽酶两类。内肽酶将蛋白质分子内部切断，形成分子量较小的月示和胨。外肽酶从蛋白质分子的游离氨基或羧基的末端逐个将肽键水解，而游离出氨基酸，前者为氨基肽酶后者为羧基肽酶。按其活性中心和最适pH值，又可将蛋白酶分为丝氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、金属蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶。按其反应的最适pH值，分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶。工业生产上应用的蛋白酶，主要是内肽酶。 　　　 蛋白酶广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。微生物蛋白酶，主要由霉菌、细菌，其次由酵母、放线菌生产。 　 催化蛋白质水解的酶类。种类很多，重要的有胃蛋白酶、胰蛋白酶、组织蛋白酶、木瓜蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶等。蛋白酶对所作用的反应底物有严格的选择性，一种蛋白酶仅能作用于蛋白质分子中一定的肽键，如胰蛋白酶催化水解碱性氨基酸所形成的肽键。蛋白酶分布广，主要存在于人和动物消化道中，在植物和微生物中含量丰富。由于动植物资源有限，工业上生产蛋白酶制剂主要利用枯草杆菌、栖土曲霉等微生物发酵制备。 　　 2国内外酶制剂的生产和应用现状　 据报道，全世界已发现的酶有5000多种，目前工业上生产的酶有300多种，真正达到工业规模的只有20多种[1]。剂型和品种有600多个。1998年全世界工业酶制剂销售额为16亿美元。预计到2008年，销售额将有所大突破。据90年代初统计，世界上酶制剂生产厂商有70多家，其中较大的 有25家。最大的8家酶制剂生产厂商是[2]：　　 (1) Novo Nordisk（诺和诺德公司，丹麦）　　 (2) Gist2Brocades（荷兰）　　 (3) Cultor（科特公司，芬兰）　　 (4) Genencor International（杰能科公司 ,美国）　　　 (5) Solvay（苏尔威公司，比利时）　　　 (6) Chr1 Hansen（汉森公司，丹麦）　　　 (7) Rhone Ponlenc（罗兰·普朗克公司，法国）　 (8) Quest（荷兰）　 目前，世界上工业用酶涉及的应用领域达10多个部门，主要工业用酶有10多种。　　　 我国酶制剂工业经过近40年的努力，形成一定的生产规模。从90年代起，通过引进国外先进技术和国际合作，技术水平和设备装备水平有了很大进步，生产能力、产品品种和质量有了很大提高。少数产品已经达到90年