产琼脂糖酶海洋微生物的筛选鉴定及酶学性质研究-福州大学学报.pdfVIP

第４３卷 第２期 福州大学学报（自然科学版） Ｖｏｌ．４３Ｎｏ．２ ２０１５年４月 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｕｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎ） Ａｐｒ．２０１５ ＤＯＩ：１０．７６３１／ｉｓｓｎ．１０００－２２４３．２０１５．０２．０２７８ 文章编号：１０００－２２４３（２０１５）０２－０２７８－０７ 产琼脂糖酶海洋微生物的筛选鉴定及酶学性质研究 韩尧跃，林 娟，张建美，叶秀云 （福州大学生物科学与工程学院，福建省海洋酶工程重点实验室，福建 福州　３５０１１６） 摘要：从红藻中筛选获得一株能产生明显液化现象并具有较高琼脂糖酶活力的菌株Ａｇ－１，经生理生化实验和 １６ＳｒＤＮＡ序列分析鉴定为弧菌属（Ｖｉｂｒｉｏｓｐ．）．酶学性质研究表明，该酶的最适反应温度为５０℃，４０～５０℃水 浴保温１ｈ可保持６８％以上的酶活力；最适反应ｐＨ值为８．０，在ｐＨ７．０～８．０保温１ｈ可保持９０％以上的酶活 力，在ｐＨ８．０～９．０保温１ｈ仍可保持７０％以上的酶活力，具有较好的耐热性和耐碱性；且该酶对琼脂底物具有 ＋ ２＋ ２＋ ＋ ３＋ ２＋ ２＋ ２＋ 高度专一性；Ｋ 、Ｃａ 、Ｍｇ 、Ｌｉ和Ｆｅ 对琼脂糖酶活力具有激活作用，Ｍｎ 、Ｚｎ 和Ｃｕ 对琼脂糖酶具有抑 －１ －１ 制作用．酶反应动力学实验结果表明，该酶的最适底物浓度为８ｍｇ·ｍＬ ，动力学参数Ｋ 为０．５８ｍｇ·ｍＬ ， ｍ －１ ｖ 为３．２９Ｕ·ｍｇ ． ｍａｘ 关键词：琼脂糖酶；海洋微生物；筛选鉴定；酶学性质；动力学参数 中图分类号：Ｑ９３９．９　 文献标识码：Ａ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆａｎａｇａｒａｓｅ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇｍａｒｉｎｅ ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍａｎｄｓｔｕｄｙｏｎｉｔｓｅｎｚｙｍａｔｉｃｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ＨＡＮＹａｏｙｕｅ，ＬＩＮＪｕａｎ，ＺＨＡＮＧＪｉａｎｍｅｉ，ＹＥＸｉｕｙｕｎ （ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＦｕｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＦｕｊｉａｎＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＭａｒｉｎｅ ＥｎｚｙｍｅＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｆｕｚｈｏｕ，Ｆｕｊｉａｎ３５０１１６，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｗｉｄｅ－ｔｙｐｅｓｔｒａｉｎ，ｗｉｔｈａｐｐａｒｅｎｔｌｉｑｕｅｆｉｅｄｐｈｅｎｏｍｅｎｏｎａｎｄｈｉｇｈａｇａｒａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓ ｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｒｅｄ－ａｌｇａｅ．ＴｈｅｓｔｒａｉｎｗａｓｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｓＶｉｂｒｉｏｓｐ．ｂｙｉｔｓｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ，ａｎｄｓｅｑｕｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆ１６ＳｒＤＮＡ．Ｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｒｅａｃｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｏｆｔｈｅａｇａｒａｓｅ ｗａｓ５０℃，ａｎｄｔｈｅａｇａｒａｓｅｍａｉｎｔａｉｎｅｄｍｏｒｅｔｈａｎ６８％ｏｆｉｔｓｍａｘｉｍｕｍａｃｔｉｖｉｔｙａｆｔｅｒｉｎｃｕｂａｔｉｏｎｆｏｒ１ｈ ｕｎｄｅｒ４０～５０℃．ＴｈｅｏｐｔｉｍｕｍｒｅａｃｔｉｏｎｐＨｏｆｔｈｅａｇａｒａｓｅｗａｓ８．０，ａｎｄｔｈｅａｇａｒａｓｅｒｅｔａｉｎｅｄｍｏｒｅ ｔｈａｎ９０％ ａｎｄ７０％ ｏ