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细胞工程 植物的
专题二 细胞工程;一、动物细胞培养;4.动物细胞培养的过程: ;注: (1)组织块多从胚胎或幼龄动物获取(分裂能力强) (2)贴壁生长 和接触抑制 (3)原代培养和传代培养 (4)细胞株和细胞系;5.细胞的保存——冷冻和复苏: 短期:一般低温 (动物细胞4℃,几十天至几个月) 冷冻 长期:-196 ℃液氮(细胞“休眠”) 复苏 6.细胞培养的应用 (1)蛋白质生物制品的生长(酶\生长因子\单抗\疫苗) (2)皮肤移植材料的培育 (3)有毒物质检测 (4)生理、病理、药理学研究;二、植物组织培养;2.原理—— 植物细胞的全能性 (1)概念:植物体的每一个活细胞都有形成完整植物体 的遗传潜能。 (2)全能性的高低: 受精卵生殖细胞体细胞;植物细胞动物细胞 ?植物体内,细胞为什么没有表现出全能性? 基因在特定的时间和空间条件下选择性表达,即分化。 (3)全能性表达的条件: ;3.培养条件;营养物质;4. 植物组织培养过程;①叶片接种到培养基上;5.小结: (1)外植体: 离体的植物器官、组织或细胞 (2)愈伤组织: 高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞 (3)脱分化要避光;再分化要有光照 (4)再分化的两种方式: 不定芽;胚状体(胡萝卜) (5)培养基特点:固体培养基(琼脂); 植物激素(细胞分裂素和生长素) (6)植物激素的作用: 细胞分裂素/生长素的比例 ;6.植物组织培养的应用: (1)植物的快速繁殖(微型繁殖) (2)培育无病毒植株 选材:根尖茎尖(生长点细胞) (3)生产植物产品 ?是不是所有的植物组织培养都以培养植株为目的? (4)制造人工种子(未过关、优缺点) 胚状体 人工种子 人造胚乳 人工种皮 (5)单倍体育种:花药离体培养 (6)转基因植物的培养:和基因工程结合 (7)突变体的利用;补:植物细胞和动物细胞培养的比较;三、细胞融合技术;2.原理: 3.诱导融合的技术: 化学法:聚乙二醇(PEG) 物理法:电击、震荡、离心、激光等 生物法:灭活病毒 4.融合过程: 5.动植物融合的不同: 植物细胞融合有去壁和细胞壁再生的过程 ?如何去壁?;四、单克隆抗体的制备1.传统抗体制备方法及缺点;;流程图: ;4.应用: (1)可用于作为诊断试剂:准确,高效,快速 “早早孕试纸” (2)可用于疾病治疗 (3)可用于运载药物 (作为运载对应疾病的药物的 “生物导弹”。“生物导弹”=单克隆抗体+药物) 5.小结:单克隆抗体的制备用到的技术: 动物细胞融合;动物细胞培养 ;五、植物体细胞杂交技术;1.过程: 注:去壁方法;促融方法; 融合完成标志(细胞壁再生) 2.优点:克服了远源杂交不亲和的障碍 3.小结:植物细胞融合+植物组织培养;特异性强、灵敏度高、产量大;六、干细胞工程;(2)造血干细胞移植: ①两种分裂方式 不均等分裂:正常情况 均等分裂:自我更新 ②三种常用的移植手段及优缺点: (3)胚胎干细胞移植: ①过程: 分离培养+遗传操作(如基因修饰)+诱导分化+移植输入 ②困难:;七、克隆技术;5.克隆技术存在的问题: (1)成功率低 (2)夭折率高:先天性??病和生理缺陷; 早衰
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