输血科常见问题1.ppt

输血科（血库）实验室及输血中常见问题 孙利 基础概念 抗原－是能与特异性抗体或免疫细胞在体内、外发生反应的物质，并常常可引起特异性免疫应答。 抗体－是指体内免疫系统所产生的蛋白质，为对某种抗原引起反应所形成，且能与该抗原或相近的抗原发生特异性反应。 不完全抗体－在生理盐水中与相应的红细胞不产生可见反应(不凝集),需通过其它介质(胶体、酶、抗人球蛋白血清等）才能出现可见的抗体。 不规则抗体 是指抗A和抗B以外的血型抗体 基础概念 血型－早期 仅指存在于红细胞上表面抗原的差异，现在　包刮白细胞、血小板表面抗原的差异。 血型－可分ABO、RH、MNSs等血型系统，共有29系统．共有400多种抗原。 ＡＢＯ亚型：指虽然属同一血型抗原，但结构和性能上有一定差异． ＡＢＯ血型抗体：IgG IgM IgA IgD IgE 天然IgM 免疫 IgG　前两者最多见。 基础概念 ABO血型系统：1900年卡尔兰德斯坦那发现 根据红细胞上是否有A和B抗原将人类分四种血型。 A型：红细胞含有A抗原，血清（浆）中有B抗体。 B型：红细胞含有B抗原 ，血清（浆）中有A抗体。 AB型：红细胞含有A、B抗原，血清（浆）中无AB抗体。 O 型：红细胞上无A、B抗原，血清（浆）中有A、B抗体。 基础概念 血型物质：每个人专有的血型抗原物质。主要存在于红细胞，广泛存在于其他组织和体液中。 两种形式　 醇溶性　水溶性 意义　　鉴定血型　　鉴定抗体性质　可测脏器和组织血型　 　　 ＡＢＯ血型鉴定 卡式微量凝胶法　(具体操作见操作规程) 操作要点：被检者1%红细胞悬液，前四孔加50微升，后两孔加血浆50微升，(前2孔是正定型，第3孔是D，第4孔是对照，第5、6是反定型）放专用的离心机离心5分钟，沉底部的是阴性，在上层或中层算阳性。 注意观察： 1、正反结果是否一致， 2、D孔红细胞是否沉降，在上层或中层结果是阳性,红细胞沉底部阴性者（需进一步用手工法，单克隆抗D试剂确定，操作方法：2-3%红细胞悬液+2滴单克隆抗D试剂，放置37℃水域15分钟，用1500转/分，离心3分钟，在显微镜下看结果，凝集为阳性，无凝集为阴性。） 　 ＡＢＯ血型鉴定及影响因素 凝胶微柱法　专用仪器试剂　标准化　微机化 质量控制　 正反定型结果不一致　　　 技术失误　　假阴性　　假阳性 血清问题 被检者红细胞问题 免球致敏 遗传或获得性表面异常多凝集 血型鉴定影响因素 异常基因 亚型中弱抗原 近期输血 呈混合外观凝集 嵌和体血型 疾病因素导致抗原减弱 白血病 MDS 血型特异物质过高 卵巢囊肿　血型物质高 获得性B 由革兰阴性杆菌的作用 红C有类B 多凝集、全凝集　　细菌感染 血型鉴定影响因素 血浆置换 异常血浆蛋白 不规则抗体存在 低丙种球蛋白血症 不凝集 弱凝集 药物等因素 右旋糖酐　激素　青霉素 年龄因素 ＡＢＯ血型鉴定 正反定性不一致的解决办法： 重复试验　 洗涤被测红细胞　 换试剂或方法测　 用相关亚型试剂 相关试验加以鉴别 吸收试验 放散试验　 Ｒh血型鉴定 卫生部要求： 鉴定ＲhＤ阴阳性 试管法 抗Ｄ血清２滴＋被检2-3％红细胞悬液２滴混匀 1500转/分 离心2分钟 凝集为阳性。阴性：要求37℃水浴15分钟，离心检测。 卡式凝胶微柱 弱D者：受血者划定Ｒh阴性，供血者划定Ｒh阳性。 注意 在交叉配血中，如发现某孔弱凝集（凝胶层中有拖带），必需复检，（包刮：供、受两者血型鉴定，原方法、凝聚胺交叉配血法、）。确认安全，才可发出。 如，在卡式交叉配血中出现，次侧不合，首先复检受、供血者的血型，ABO和RHD血型相同，应加做抗人球蛋白试验，如患者阳性，与临床联系，说明，患者血球上有不完全抗体，建议临床改输洗涤红细胞，并马上向市血站约出洗涤红细胞。 如出现正反鉴定不一致，必须重新鉴定，并用手工试管法进行正反血型鉴定，以试管法为准，如仍然不一致，马上反馈给主任处理。 凝聚胺原理 红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位， Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。 凝聚胺技术首先利用底离子溶液（LIM），降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。 其后，加入凝聚胺（Polybrene）溶液，它是一种高价阳离子多聚物，肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，