溶液中金属盐对菌高级结构的影响.PDFVIP

第 2 1卷第 3期 化 学 研 究 与 应 用 Vo l. 2 1,No. 3 　 2009年 3月 Chem ical R esearch and App lication M ar. , 2009 　 文章编号 : 1004 1656 (2009) 溶液中金属盐对溶菌酶高级结构的影响 1, 2 2 2 2 1 李文涓 ,李 　芳 ,唐燕红 ,黄 　波 , 曾成鸣 ( 1. 陕西师范大学化学与材料科学学院 ,陕西 　西安 　7 10062; 2. 陕西师范大学生命科学学院 ,陕西 　西安 　7 10062) 摘要 :探索蛋白质结构稳定性及其淀粉样纤维化的环境条件具有重要意义 。本文采用了荧光光谱法研究溶 液中的金属盐对鸡卵清溶菌酶内源荧光和淀粉样纤维化的影响 。结果表明 ,金属盐能够增加溶菌酶的热稳 定性 ,减小淬灭剂对内源荧光的作用 ,对溶菌酶的高级结构具有一定的稳定作用 。另一方面 ,在长时间热胁 迫的情况下 ,金属盐可促进溶菌酶分子的聚集而纤维化 。金属盐的这种双重作用分别与其阳离子和阴离子 的性质有关 。 关键词 :溶菌酶 ;热变性 ;淀粉样纤维化 ; 内源荧光 中图分类号 : Q518. 4　　文献标识码 : A 近年来 ,有很多关于与蛋 白质构象变化相关 粉样纤维化过程中的作用 。这对于深入理解蛋白 的人类疾病的报道 ,如 A lzheim er ’s疾病 ,疯牛病 , 质在生命过程中的行为 ,探索蛋 白质构象相关疾 帕金森氏病 , 以及 2 型糖尿病等均与蛋 白质或多 病的机制具有重要意义 。 肽的淀粉样纤维化沉积有关 [ 1, 2 ] 。实际上 ,一些与 [ 3 ] 1　试验部分 疾病不相关的蛋白质也可以形成淀粉样纤维 , 所以,淀粉样纤维化是所有蛋白质的共性 。蛋 白 1. 1　材料与仪器 质淀粉样纤维化的机制 目前尚不清楚 。已有的研 实验药 品及试剂 : 鸡 卵清 溶 菌酶 , 硫黄 素 究结果表明 ,蛋白质的成纤维倾向除了与其序列 ( Th ioflavin T, ThT) , 丙烯酰胺购 自美国 Sigm a 公 和结构有一定的关系外 ,更重要的是与蛋 白质所 司 ;金属盐和其它试剂均为国产分析纯试剂 。 处的环境条件密切相关 。在生物体 内, 蛋 白质总 ( 实验仪器 : L S55 型荧光分光光度计 美 国 是处于一个复杂的缓冲体系中 ,其中的金属离子 ) Perk inE lm er公司 ; SPM 9500J3 型原子力显微镜 和酸根离子通过与蛋白质的相互作用 ,使得蛋 白 ( ) 日本岛津公司 。 质分子能够保持正确的结构 ,从而发挥正常的生 1. 2　样品制备 物功能 。一旦这种体系失衡 , 蛋白质就可能产生 溶菌酶蛋白溶液 : 200 m g鸡卵清溶菌酶蛋白溶 错误折叠而生成淀粉样聚集体 。