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云南花生丛枝植原体16srrna和核糖体蛋白基因序列-植物病理学报
植物病理学报 ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA 44(4):370 ̄378(2014) doi:10.13926/j.cnki.apps.2014.04.005 云南花生丛枝植原体 16S rRNA和核糖体 蛋白基因序列分析 1 2 1ꎬ3 1∗ 1 万琼莲 ꎬ杨子祥 ꎬ王连春 ꎬ蔡 红 ꎬ陈海如 1 2 ( 云南农业大学植物病理重点实验室ꎬ昆明650201ꎻ 云南省农业科学院热区生态农业研究所ꎬ元谋 651300ꎻ 3玉溪师范学院资源环境学院ꎬ玉溪653100) 摘要:利用植原体16SrRNA基因及核糖体蛋白基因(ribosomal proteinꎬrp)通用引物对发生在云南元谋的花生丛枝病病株 DNA进行PCR扩增ꎬ并对扩增片段进行序列测定ꎮ 扩增获得的云南元谋花生丛枝植原体(PnWB ̄YNym)16S rDNA、16S ̄ 23SrDNA和23SDNA片段总长1806 bpꎬrp基因扩增片段长1 171bpꎮ 云南株系与来源于台湾和海南的花生丛枝植原体 均有较高同源性ꎮ 比较16SrDNA片段ꎬ发现云南株系在5个位点上与来自台湾或海南的株系存在碱基差异ꎬ其中有 1个 位点的差异是云南元谋株系特异的ꎻ再分别比较核糖体蛋白rplV ̄rpsC 2个基因所编码的氨基酸序列ꎬ发现云南株系rpsC 编码的第194位氨基酸与台湾和海南的株系存在差异ꎮ 经16SrDNA片段系统进化及iPhyClassifier在线分析ꎬ表明PnWB ̄ YNym在分类上属于16SrII ̄A亚组成员ꎬ与候选种‘Candidatus Phytoplasma australasiae’相关ꎻ基于rp基因构建的系统进化 树表明ꎬPnWB ̄YNym与16SrII ̄A亚组各成员聚为同一亚进化支(iii)ꎮ 关键词:云南元谋花生丛枝ꎻ植原体ꎻ16SrDNAꎻ核糖体蛋白基因ꎻ序列分析 Sequence analysis of 16S rRNA and ribosomal protein gene of peanut witches’ ̄ broom phytoplasma disease in Yunnan Province 1 2 WAN Qiong ̄lian ꎬYANG Zi ̄xiang ꎬ 1ꎬ3 1 1 1 WANG Lian ̄chun ꎬCAI Hong ꎬCHEN Hai ̄ru ( Key Laboratory for Plant Pathology of Yunnan ProvinceꎬYunnan 2 Agricultural UniversityꎬKunming650201ꎬChinaꎻ InsitituteofTropicalEco ̄agricultural SciencesofYunnanAcademyofAgricul ̄ 3 tural SciencesꎬYuanmou 651300ꎬChinaꎻ College of ResourcesandEnvironmentꎬYuxi Normal UniversityꎬYuxi 653100ꎬChina) Abstract:Using PCR with phytoplasma universal primer pair for 16S rRNA and ribosomal protein gene (rp) wasusedtodetectphytoplasmaassociatedwithpeanutwitches’ ̄b
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